[發明專利]一種酶解法制備淫羊藿苷的方法在審
| 申請號: | 201811307005.3 | 申請日: | 2018-11-05 |
| 公開(公告)號: | CN109295121A | 公開(公告)日: | 2019-02-01 |
| 發明(設計)人: | 夏之寧;尹蔓妮;張起輝 | 申請(專利權)人: | 重慶大學 |
| 主分類號: | C12P17/06 | 分類號: | C12P17/06 |
| 代理公司: | 北京同恒源知識產權代理有限公司 11275 | 代理人: | 趙榮之 |
| 地址: | 400044 重*** | 國省代碼: | 重慶;50 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 淫羊藿苷 朝藿定C 酶解法 淫羊藿 制備 鼠李糖苷酶 環境友好 酶解反應 藥物制備 產率 轉化 | ||
1.一種酶解法制備淫羊藿苷的方法,其特征在于,所述方法為通過酶解法將淫羊藿中的朝藿定C轉化為淫羊藿苷。
2.根據權利要求1所述一種酶解法制備淫羊藿苷的方法,其特征在于,所述淫羊藿為巫山淫羊藿。
3.根據權利要求1所述一種酶解法制備淫羊藿苷的方法,其特征在于,所述酶解法采用的酶為鼠李糖苷酶。
4.根據權利要求1所述一種酶解法制備淫羊藿苷的方法,其特征在于,所述方法的具體操作如下:
(1)淫羊藿浸膏的制備:取淫羊藿粉末,過三號篩后加入體積分數為70%-75%的乙醇,所述巫山淫羊藿粉末與乙醇的質量體積比為1:20~30,g:mL;旋轉蒸發得到殘留固體,真空干燥即得淫羊藿浸膏;
(2)酶解反應:按照1:1,mmol:U的比例依次加入淫羊藿浸膏與鼠李糖苷酶,再加入弱酸性緩沖溶液與酶穩定劑,所述淫羊藿浸膏與酸性緩沖溶液、酶穩定劑的質量體積比為1:2:2,g:mL:mg,在40~60℃的水浴條件下進行酶解反應,抽取少量反應液檢測朝藿定C轉化率達到98%時進行沸水滅活結束反應;
(3)淫羊藿苷純化:將(2)中酶解反應結束后的反應液用等體積的乙酸乙酯進行萃取三次,收集上層液體,旋轉蒸發后進行重結晶得到純化的淫羊藿苷。
5.根據權利要求4所述一種酶解法制備淫羊藿苷的方法,其特征在于,步驟(1)中所述淫羊藿粉末與乙醇的質量體積比為1:25,g:mL。
6.根據權利要求4所述一種酶解法制備淫羊藿苷的方法,其特征在于,步驟(2)中所述弱酸性緩沖溶液為磷酸鹽緩沖溶液,所述緩沖溶液的濃度為0.2mol/L,所述緩沖溶液的pH為6.5。
7.根據權利要求4所述一種酶解法制備淫羊藿苷的方法,其特征在于,所述酶穩定劑為牛血清白蛋白,所述牛血清白蛋白的濃度為1mg/mL。
8.根據權利要求4所述一種酶解法制備淫羊藿苷的方法,其特征在于,步驟(2)中所述酶解反應時的水浴溫度為50℃。
9.根據權利要求4所述一種酶解法制備淫羊藿苷的方法,其特征在于,步驟(3)中所述重結晶所用的溶劑為甲醇。
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