[發明專利]一種防治線蟲病的生防菌株SFC-3及其應用

在審

• 申請號: 201811298495.5
• 申請日: 2018-11-02
• 公開（公告）號: CN109207381A
• 公開（公告）日: 2019-01-15
• 發明（設計）人: 陳國參;趙俊杰;王繼雯;李冠杰;甄靜;岳丹丹;鞏濤;楊文玲;杜志敏;孫晨陽;楊金星
• 申請（專利權）人: 河南省科學院生物研究所有限責任公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N1/02;A01N63/04;A01P5/00;C12R1/885
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務所(普通合伙) 41113
• 代理人: 蔡文雅

本發明涉及防治線蟲病的生防菌株SFC?3及其應用，可有效解決現有防治根結線蟲病害的生防菌株存在防效不穩定、使用成本高的問題，其分類命名為棘孢木霉（Trichoderma asperellum），保藏編號為：CGMCC NO.16097，生防菌株SFC?3在濃度為1×10⁹CFU/mL下，對根結線蟲蟲卵孵化和二齡幼蟲都有很好的抑制作用；該菌株能顯著降低線蟲的入侵，對根結線蟲病害的防治效果為78.51%，本發明菌株可以在蔬菜幼苗移栽時灌根使用，且有促生作用。

技術領域

本發明涉及植物保護領域，特別涉及一種防治線蟲病的生防菌株SFC-3及其應用。

背景技術

蔬菜根結線蟲是一種嚴重影響蔬菜生長的土傳性病害，屬于線蟲門、側尾腺綱、墊刃目、異皮總科、根結線蟲科、根結線蟲屬，其主要危害作物的根部，能侵染根部細胞，使根部輸導組織遭到破壞，從而失去吸收養分和水分的能力，導致作物營養不良而早衰，甚至整株干枯死亡。至今，約有80多種根結線蟲種類在國際上已經被報道。而我國記錄的有效種有39個，可以侵染包括單子葉植物、雙子葉植物和草本植物的114科、3000多種植物。引起蔬菜根結線蟲病的主要有以下4個種：南方根結線蟲、北方根結線蟲、爪哇根結線蟲和花生根結線蟲。近年來，我國保護地蔬菜發展迅速，溫室連年種植同種蔬菜作物，致使許多老齡溫室根結線蟲病害日趨嚴重，全國每年約有50%的溫室蔬菜存在不同程度的根結線蟲病害，造成的經濟損失約十幾億元。而蔬菜根結線蟲寄住范圍廣、致病性強、繁殖速度快、侵染具有掩蔽性且能通過病土、病苗和灌水等方式傳播，防治比較困難，給蔬菜生產造成巨大的損失，因此對根結線蟲的防治已經成為一項非常重要的農業生產任務。

目前，蔬菜根結線蟲的防治主要依賴化學農藥防治，但是化學藥劑的使用對土壤環境造成不可估量的破壞，同時殘留的農藥通過食物鏈富集作用轉移到人體，最終對人體造成傷害。因此大多數殺蟲劑逐漸被禁止或高度限制使用于保護地蔬菜生產。生物防治是近年來發展較為迅速的一種線蟲防治方法，其利用線蟲的天敵來抑制線蟲的發生，其途徑主要是通過增強自然發生的拮抗物活性或引入其他活性物實現的。生物防治所篩選的目標拮抗物均來源于自然環境中，對土壤環境友好，不污染環境，綠色環保，具有可持續性，符合綠色農業的發展要求，是一種比較理想的防治技術。目前現有防治根結線蟲病害的生防菌株存在防效不穩定、使用成本高的缺陷，因此，發明一種新的防治線蟲病的生防菌株勢在必行。

發明內容

針對上述情況，為解決現有技術之缺陷，本發明之目的就是提供一種防治線蟲病的生防菌株SFC-3及其應用，可有效解決現有防治根結線蟲病害的生防菌株存在防效不穩定、使用成本高的問題。

本發明解決的技術方案是，本發明所述生防菌株SFC-3，其分類命名為棘孢木霉（Trichoderma asperellum），已于2018年8月22日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為：CGMCC NO .16097。保藏地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號。

生防菌株SFC-3的分離方法：

稱取10g根結線蟲病害嚴重的土壤樣品加入裝有90mL無菌水的三角瓶中，置搖床振蕩25-35分鐘，得到稀釋倍數為10^-1的土壤稀釋液，取1mL 10^-1土壤稀釋液加入到裝有9mL無菌水的試管中，得到稀釋倍數為10^-2的土壤稀釋液，取300μL該稀釋液涂布到馬丁氏培養基上，28℃培養3天，待長出真菌菌落后挑邊緣菌絲轉入PDA固體培養基進行純化，獲得純化菌株；

所述的馬丁氏培養基配制方法為：20g葡萄糖、5g蛋白胨、1g磷酸二氫鉀、0 .5g七水硫酸鎂、1%孟加拉紅溶液3mL、20g瓊脂，加入蒸餾水至1000mL，在121℃滅菌30min，使用時每100mL培養基中加入1%鏈霉素液0.3mL；