[發明專利]免疫性血小板減少癥的miRNA標志物及試劑盒和應用在審
| 申請號： | 201811296997.4 | 申請日： | 2018-11-01 |
| 公開（公告）號： | CN109295213A | 公開（公告）日： | 2019-02-01 |
| 發明（設計）人： | 錢琤;吳天勤;任傳路;鄧安梅;嚴文穎;沈紅石;李征洋 | 申請（專利權）人： | 中國人民解放軍第一00醫院 |
| 主分類號： | C12Q1/6883 | 分類號： | C12Q1/6883;C12N15/113;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京華際知識產權代理有限公司 11676 | 代理人： | 李浩 |
| 地址： | 215000 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 免疫性血小板減少癥 標記物 引物 堿基序列 試劑盒 制備 輔助診斷試劑 診斷試劑盒 臨床應用 特異性強 靈敏度 創傷性 可用 應用 診斷 檢測 進程 開發 | ||
1.一種免疫性血小板減少癥的miRNA標志物，其特征在于：該miRNA標記物為hsa-miR-302e，其堿基序列如SEQ ID NO：1所示。
2.一種免疫性血小板減少癥的miRNA標志物的引物，其特征在于：該miRNA標記物的引物的堿基序列如SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示。
3.權利要求1所述miRNA標志物在制備抑制免疫性血小板減少癥的藥物或制備免疫性血小板減少癥輔助診斷試劑盒中的應用。
4.權利要求2所述miRNA標志物的引物在制備抑制免疫性血小板減少癥的藥物或制備免疫性血小板減少癥輔助診斷試劑盒中的應用。
5.一種免疫性血小板減少癥輔助診斷試劑盒，其特征在于：該試劑盒用于檢測外周血中hsa-miR-302e的表達水平。
6.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒含有免疫性血小板減少癥的miRNA標志物；所述miRNA標志物的堿基序列如SEQ ID NO：1所示。
7.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒含有miRNA標志物的引物，所述引物的堿基序列如SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示。
8.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒還包括總RNA提取常用試劑、cDNA反轉錄引物、反轉錄常用試劑、熒光定量Q-PCR反應常用的聚合酶及試劑和熒光檢測試劑；
優選地，所述cDNA反轉錄引物的序列如SEQ ID NO：4所示。
9.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒還包括標準品和/或對照品；
優選地，所述標準品和/或對照品為內源性miRNA-U6RNA。
10.一種檢測免疫性血小板減少癥的miRNA標志物的方法，其特征在于，包括以下步驟：
步驟一，分離純化外周血，抽提血液樣本中的總RNA；
步驟二，將總RNA反轉錄為cDNA；
步驟三，通過熒光定量Q-PCR對cDNA和參照基因進行擴增檢測has-miR-302e的表達水平；
步驟四，進行統計分析評估；
優選地，所述反轉錄采用的引物序列如SEQ ID NO：4所示；
優選地，所述熒光定量Q-PCR采用的引物序列如SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示；
優選地，所述參照基因為內源性miRNA-U6RNA。
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