[發明專利]亞香棒蟲草胞外多糖的制備方法及其應用

在審

• 申請號: 201811294846.5
• 申請日: 2018-11-01
• 公開（公告）號: CN109536545A
• 公開（公告）日: 2019-03-29
• 發明（設計）人: 鄧贛奇;劉燊;冷桂華;張輝華;林樹茂
• 申請（專利權）人: 佛山科學技術學院
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;A61K31/715;A61P35/00;C12R1/645
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 龍栢強

本公開提供了亞香棒蟲草胞外多糖的制備方法及其應用。其制備方法，包括步驟：1)菌種活化；2)擴大培養；3)發酵培養；4)胞外粗多糖的提取；5)胞外粗多糖的提純。值得的亞香棒蟲草胞外多糖在對乳腺癌細胞(MCF?7)、神經母癌細胞(SH?SY5Y)或肺腺癌細胞(A549)都有顯著抑制作用。該制備方法能夠高效提取亞香棒蟲草胞外多糖，有助于為后續研究用蟲草多糖與治療癌癥提供充足的支撐。同時，還經過試驗證明所述亞香棒蟲草胞外多糖可以有效抑制乳腺癌細胞、神經母癌細胞、肺腺癌細胞，為相關科研提供科學的依據。

技術領域

本發明涉及植物醫藥技術領域，特別涉及亞香棒蟲草在抗癌領域的作用。

背景技術

隨著經濟的增長，人們的生活條件越來越好，但人們也逐漸發現每年因惡性腫瘤而死亡的人數也在逐漸增加，而這也推動了科研人員對于腫瘤藥物的開發以及對其機制的深入研究。蟲草主要由兩部分構成：千尸毛“蟲”和頭部長出來的真菌“草”，它的各種活性成分物質具有降壓及舒張血管、調節免疫系統功能、抗腫瘤、抗菌、抗氧化等多種功效。冬蟲夏草被稱為我國的“中藥之王”，位列三大補品之首，研究發現，在中國境內有100多種蟲草，只有一種叫做冬蟲夏草，足見其稀缺珍貴。

而隨著天然產物分離純化技術、細胞生物學、藥效學和藥理學的發展，天然產物抗腫瘤的研究正成為一個越來越熱門的研究領域，因為它相比于化療來治療癌癥的副作用小，比較被人們接受，一旦研究人員能夠發明出一種天然活性產物制劑來治療癌癥，那對于世界的貢獻不亞于工業革命或者計算機信息技術革命。蟲草多糖又作為抗腫瘤活性的重要成分之一，也是引起越來越多的研究學者關注的原因之一。蟲草多糖也是國際醫學上公認的人體免疫增強劑，它可以調節機體的免疫功能，增強體液免疫和細胞免疫，從而提高機體的免疫力。

同時，人們也逐漸發現，有些蟲草的化學成分及藥理作用與冬蟲夏草相似，例如：古尼蟲草、蛹蟲草、涼山蟲草、巴西蟲草、亞香棒蟲草等，他們都可替代冬蟲夏草入藥，并對人體產生相同的功效。

亞香棒蟲草(Cordyceps hawkesii Gray.)又稱霍克斯蟲草，蟲體外面灰黃色，“草部”呈淡灰色至灰黑色，亞香棒蟲草比較脆而且容易折斷，氣微香，味淡，其主要靠寄生鱗翅目蝙蝠蛾科棒蝠蛾屬(Napialus)幼蟲來生長。在成分和功能作用上與冬蟲夏草十分接近，因此有些地方直接用亞香棒蟲草代替冬蟲夏草食用，具有止咳、化痰、定喘、安神、益精氣及益腎壯陽等功效。

蟲草多糖是亞香棒蟲草中含量最高的活性物質，它是一類高分子化合物，構造復雜，且擁有廣泛的藥理作用，引發越來越多的研究學者關注。蟲草多糖是國際醫學上公認的人體免疫增強劑，作用效果良好，可以調節機體的免疫功能，增強體液免疫和細胞免疫，從而提高機體的免疫力。多糖是組成生物體的四大主要物質之一，普遍存在于各類生物中，多糖由單糖分子以糖苷鍵結合而成的，在生物體內扮演著重要角色，具有多方面的生物活性。

發明內容

本公開的目的在于提供了亞香棒蟲草胞外多糖(BW)的制備方法。

亞香棒蟲草胞外多糖的制備方法，包括以下步驟：

1)菌種活化：制備馬鈴薯平板培養基并接種亞香棒菌絲體菌25℃培養三天；

2)擴大培養：制備馬鈴薯液體培養基，從活化培養所得的亞香棒菌絲體菌中選取生長良好的菌絲進行接種，振蕩培養十天；

3)發酵培養：制備發酵培養基，從擴大培養基中挑取生長良好的菌種進行接種，振蕩培養十天；

4)胞外粗多糖的提取：將發酵培養所得的亞香棒菌絲體菌進行抽濾，以乙醇洗滌發酵培養的器皿再次抽濾，合并兩次濾液進行濃縮，得到濃縮液；

5)胞外粗多糖的提純：向濃縮液加入3-4倍上清液體積的85％的乙醇，沉淀后過濾，再用乙醚清洗固體，過濾，得到胞外多糖。