[發明專利]亞香棒蟲草胞外多糖的制備方法及其應用

在審

• 申請號: 201811294846.5
• 申請日: 2018-11-01
• 公開（公告）號: CN109536545A
• 公開（公告）日: 2019-03-29
• 發明（設計）人: 鄧贛奇;劉燊;冷桂華;張輝華;林樹茂
• 申請（專利權）人: 佛山科學技術學院
• 主分類號: C12P19/04
• 分類號: C12P19/04;A61K31/715;A61P35/00;C12R1/645
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 龍栢強

1.亞香棒蟲草胞外多糖的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)菌種活化：制備馬鈴薯平板培養基并接種亞香棒菌絲體菌25℃培養三天；

2)擴大培養：制備馬鈴薯液體培養基，從活化培養所得的亞香棒菌絲體菌中選取生長良好的菌絲進行接種，振蕩培養十天；

3)發酵培養：制備發酵培養基，從擴大培養基中挑取生長良好的菌種進行接種，振蕩培養十天；

4)胞外粗多糖的提?。簩l酵培養所得的亞香棒菌絲體菌進行抽濾，以乙醇洗滌發酵培養的器皿再次抽濾，合并兩次濾液進行濃縮，得到濃縮液；

5)胞外粗多糖的提純：向濃縮液加入3-4倍上清液體積的85％的乙醇，沉淀后過濾，再用乙醚清洗固體，過濾，得到胞外多糖。

2.根據權利要求1所述的亞香棒蟲草胞外多糖的制備方法，其特征在于，所述馬鈴薯平板培養基由以下步驟制得：將馬鈴薯洗干凈，去皮后稱取200g，并將其切碎，加入1000ml水，煮30min，用四層紗布過濾得馬鈴薯液；加入蛋白胨1％，磷酸氫二鉀0.05％，葡萄糖2％，磷酸二氫鉀0.05％，硫酸鎂0.1％，瓊脂1.8％，邊攪拌邊煮沸，直到蛋白胨和葡萄糖完全溶解，再加入200μg/ml抗生素，待冷卻45℃左右，倒平板。

3.根據權利要求1所述的亞香棒蟲草胞外多糖的制備方法，其特征在于，所述馬鈴薯液體培養基由以下步驟制得：將馬鈴薯洗干凈，去皮后稱取200g，并將其切碎，加入1000ml水，煮30min，用四層紗布過濾得馬鈴薯液；加入蛋白胨1％，磷酸氫二鉀0.05％，葡萄糖2％，磷酸二氫鉀0.05％，硫酸鎂0.1％，200μg/ml抗生素，殺菌鍋滅菌。

4.根據權利要求1所述的亞香棒蟲草胞外多糖的制備方法，其特征在于，所述發酵培養基由以下步驟制得：按葡萄糖10g/L，蔗糖25g/L，麥芽糖5g/L，蛋白胨4g/L,硝酸銨3g/L，硫酸鎂0.8g/L，磷酸氫二鉀0.4g/L，磷酸二氫鉀0.4g/L，硫酸亞鐵1.4g/L，維生素B10.03g/L,甘氨酸0.8g/L，玉米粉10g/L,酵母粉4g/L和豆粕4g/L加入水中，殺菌鍋殺菌。

5.亞香棒蟲草胞外多糖在抑制乳腺癌細胞、神經母癌細胞或肺腺癌細胞中的應用。