[發明專利]群體感應抑制劑篩選方法和應用在審
| 申請號： | 201811294609.9 | 申請日： | 2018-11-01 |
| 公開（公告）號： | CN109306369A | 公開（公告）日： | 2019-02-05 |
| 發明（設計）人： | 岳美娥;藺巧燕 | 申請（專利權）人： | 青島科技大學 |
| 主分類號： | C12Q1/34 | 分類號： | C12Q1/34 |
| 代理公司： | 青島中天匯智知識產權代理有限公司 37241 | 代理人： | 郝團代 |
| 地址： | 266000 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 群體感應抑制劑 篩選 群體感應系統 食品防腐保鮮 產物峰面積 混合化合物 中藥粗提液 電泳 策略提供 酶抑制劑 試劑消耗 水解底物 一步反應 直接測定 毛細管 酶催化 靶點 酶活 應用 自動化 分析 中介 | ||
【權利要求書】：
1.一種群體感應抑制劑的篩選方法，其特征是采用電泳中介微分析技術，在毛細管中用酶催化水解底物的一步反應，然后在紫外200 nm處直接測定產物峰面積實現酶活的測定和酶抑制劑的篩選方法；
所述的酶為5＇-甲硫腺苷核苷酶（MTAN）；
所述的底物為5＇-甲硫腺苷（MTA）；
所述的產物為腺嘌呤。
2.根據權利要求1所述的一種群體感應抑制劑的篩選方法，其特征在于：
1）將反應緩沖液、酶溶液和底物溶液分別以1-100納升體積依次導入經過分離緩沖液處理過的毛細管，所述的酶的濃度范圍為0-100μg/mL，底物的濃度范圍為0-100μg/mL，所述的底物溶液含或不含待篩選化合物；
2）使酶和底物反應0-14分鐘；
3）加上1千伏至30千伏電壓進行電泳分離；酶活用210nm處產物峰面積表示；
所述的緩沖液是pH為2.5-7緩沖液。
3.根據權利要求2所述的一種群體感應抑制劑的篩選方法，其特征在于：所述的反應緩沖液是pH為3-7緩沖液，所述的分離緩沖液是pH為2.5-6.5緩沖液。
4.根據權利要求2所述的一種群體感應抑制劑的篩選方法，其特征在于：所述的緩沖液是磷酸-氫氧化鈉緩沖液和HEPES的緩沖液。
5.根據權利要求1或2所述的一種群體感應抑制劑的篩選方法的應用，其特征在于：可用于中藥粗提液和合成小分子化合物中群體感應抑制劑的篩選。
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