[發明專利]一種新型大鼠高血壓模型的建立方法及其應用在審
| 申請號： | 201811292796.7 | 申請日： | 2018-11-01 |
| 公開（公告）號： | CN109662974A | 公開（公告）日： | 2019-04-23 |
| 發明（設計）人： | 歐和生;羅雪蘭 | 申請（專利權）人： | 廣西國際壯醫醫院 |
| 主分類號： | A61K31/713 | 分類號： | A61K31/713;A61K49/00 |
| 代理公司： | 北京卓嵐智財知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11624 | 代理人： | 郭智 |
| 地址： | 530201 廣西壯*** | 國省代碼： | 廣西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 大鼠高血壓模型 高表達質粒 內含子 可用 應用 動物疾病模型 生理鹽水稀釋 血管舒張因子 大鼠尾靜脈 高壓狀態 降壓藥物 血壓升高 正常大鼠 大鼠 構建 血壓 注射 體內 驗證 篩選 | ||
【權利要求書】：
1.一種新型大鼠高血壓模型的建立方法，其特征在于，應用人內含子源性27nt-miRNA高表達質粒誘導正常大鼠血壓升高，形成大鼠高血壓模型。
2.權利要求1的一種新型大鼠高血壓模型的建立方法，其特征在于，包括的步驟如下：
(1)人內含子源性27nt-miRNA高表達質粒的構建
1)設計人內含子源性27nt-miRNA核苷酸序列
2)根據上述核苷酸序列，用DNA合成技術得到第一鏈DNA,接著通過DNA連接反應合成雙鏈DNA，通過PCR擴增目的基因片段，所述PCR的反應體系如下：
上述PCR的反應程序為：95℃5min(1Cycle)，(98℃10s，55℃10s，72℃90s)30Cycle，72℃8min，4℃24h；
3)線性連接與序列測定；
(2)質粒的提取與注射
提取質粒，將質粒與轉染試劑混合，稀釋，經大鼠尾靜脈注射。
(3)血壓檢測
注射質粒后，應用尾動脈無創血壓測定儀定期對大鼠進行血壓測定，連續12周。
3.權利要求1或2所述的方法在制備降壓藥物篩選的應用。
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