[發(fā)明專利]一種合成索瑪魯肽的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811292613.1
• 申請日: 2018-11-01
• 公開（公告）號: CN109180801B
• 公開（公告）日: 2021-08-13
• 發(fā)明（設計）人: 李同金;趙傳海;孟巖;周勇;翟濤
• 申請（專利權）人: 漢肽生物醫(yī)藥集團有限公司
• 主分類號: C07K14/605
• 分類號: C07K14/605;C07K1/04;C07K1/06
• 代理公司: 淄博匯川知識產權代理有限公司 37295
• 代理人: 李時云

本發(fā)明采用固相化學的方法制備索瑪魯肽，能夠很好的避免雜質肽的產生，提高粗肽純度，降低生產成本。該方法首次采用Fmoc?Lys(N?ε?ADO?ADO?(γ?Glu(N?α?X)?OtBu)?OH參與固相合成索瑪魯肽(其中谷氨酸α氨基保護基X為Alloc、Mmt、Mtt、Dde或ivDde),然后脫掉保護基，在固相上脂肪酸化；同時針對索瑪魯肽工藝產生的缺1個Ala雜質肽；接18位和19位時采用Fmoc?Ala?Ala?OH,避免這一純化過程中難以除去雜質的生成；為避免產生±Gly的工藝雜質，引入Fmoc?Glu(OtBu)?Gly?OH和Fmoc?Arg(Pbf)?Gly–OH兩個二肽作為單體參與合成；通過引入這四個個片段肽參與索瑪魯肽的固相合成，提高了粗肽純度，降低了純化難度，降低了生產成本。

技術領域

本發(fā)明涉及多肽合成領域，特別涉及一種固相制備索瑪魯肽的方法。

技術背景

索瑪魯肽(Semeglutide)，商品名Ozempic，由丹麥諾和諾德公司研發(fā)，于2017年12月05日在美國上市，現(xiàn)正在中國進行臨床試驗，很快將進入中國市場。Ozempic被指定為飲食和運動的輔助手段，以改善2型糖尿病患者的血糖控制。

索瑪魯肽也是一種GLP-1類似物，與人GLP-1具有94％的序列同源性，是諾和諾德開發(fā)的第二代脂肪鏈修飾GLP-1類似物，與第一代脂肪鏈修飾GLP-1類似物利拉魯肽相比，其半衰期更長，劑量更低。索瑪魯肽保持了利拉魯肽良好的安全性和降糖有效性，且減輕體重效果優(yōu)于前兩者。

利拉魯肽為脂肪酸鏈修飾技術的第一代GLP-1類似物，修飾位點為26位賴氨酸：采用了γ谷氨酸連接子，16碳脂肪酸鏈，序列34位突變?yōu)榫彼?同源性97％)。索瑪魯肽在此基礎上進行了系統(tǒng)優(yōu)化，修飾位點仍為26位賴氨酸：采用谷氨酸-2PEG為連接子，18碳二羧酸脂肪酸鏈，序列上34位突變?yōu)橘嚢彼幔?位丙氨酸突變?yōu)榉翘烊话被酇ib，避免被DPP-IV酶切失活。

索瑪魯肽化學表述為Aib⁸,Arg³⁴ Lys²⁶-[N-ε-ODA-ODA-(γ-Glu(N-α-18-十八烷酸-1-酰基))]-GLP-1(7-37)分子式為C₁₈₇H₂₉₁N₄₅O₅₉，相對分子質量為4113.58，CAS號為910463-68-2，序列信息如下：

目前，諾和諾德公司主要通過基因重組技術，利用酵母生產索瑪魯肽主鏈Arg³⁴-GLP-1^9-37，然后連接上His-Aib；但由于采用基因重組技術只能生產主鏈Arg³⁴-GLP-1^9-37，還需要利用化學手段和His-Aib反應，生成索瑪魯肽主鏈Aib⁸,Arg³⁴-GLP-1^7-37；然后在Lys²⁶的側鏈氨基上接上長效修飾基團。由于Aib⁸,Arg³⁴-GLP-1^7-37的側鏈及N端氨基均未保護，存在多個活性位點，所以此過程會產生較多雜質，損失較大。