[發明專利]一種添加檸檬酸鈉促進銅綠假單胞菌降解芘的方法及其應用

有效

• 申請號: 201811285102.7
• 申請日: 2018-10-31
• 公開（公告）號: CN109402001B
• 公開（公告）日: 2021-10-19
• 發明（設計）人: 李靜;鄧毛程;栗瑞敏;陳聶欣;王瑤;吳豐裕;張慧
• 申請（專利權）人: 廣東輕工職業技術學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;B09C1/10;C02F3/34;C02F101/34;C12R1/385
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運貞

1.一種添加檸檬酸鈉促進銅綠假單胞菌降解芘的方法，其特征在于包括如下步驟：在存在芘的環境中加入檸檬酸鈉和銅綠假單胞菌，通過檸檬酸鈉促進銅綠假單胞菌降解芘；

所述的環境包括水體和土壤；

所述的銅綠假單胞菌為銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）PA06，其保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC NO：M2017082。

2.根據權利要求1所述的添加檸檬酸鈉促進銅綠假單胞菌降解芘的方法，其特征在于包括如下步驟：在存在芘的環境中加入檸檬酸鈉、銅綠假單胞菌、氮源和無機鹽，通過檸檬酸鈉促進銅綠假單胞菌降解芘。

3.根據權利要求1所述的添加檸檬酸鈉促進銅綠假單胞菌降解芘的方法，其特征在于：所述的銅綠假單胞菌是處于對數增生長期中后期的銅綠假單胞菌，其通過如下步驟制備得到：以檸檬酸鈉為碳源配制適宜銅綠假單胞菌生長的液體培養基，經除菌后，接種銅綠假單胞菌菌種，振蕩培養至菌體處于對數增生長期中后期。

4.根據權利要求3所述的添加檸檬酸鈉促進銅綠假單胞菌降解芘的方法，其特征在于：所述的液體培養基的組成如下：檸檬酸鈉 15～20 g/L，蛋白胨 5～10 g/L，KH₂PO₄ 2～2.5g/L，MgSO₄?7H₂O 0.4～0.5 g/L；水為溶劑，pH為6.5～7.5；

所述的振蕩培養的條件為：于28～30℃、150～200 rpm的轉速培養12～16 h。

5.根據權利要求1或2所述的添加檸檬酸鈉促進銅綠假單胞菌降解芘的方法，其特征在于：

所述的檸檬酸鈉的用量為：當所述的環境為水體時，按5～15 g/L的量添加檸檬酸鈉；

所述的銅綠假單胞菌的接種量為：當所述的環境為水體時，按體積百分比5%～10%的量添加；

所述的存在芘的環境中芘的含量為200～300 mg/L。

6.根據權利要求2所述的添加檸檬酸鈉促進銅綠假單胞菌降解芘的方法，其特征在于：

所述的氮源為蛋白胨；

所述的無機鹽為KH₂PO₄和MgSO₄?7H₂O中的一種或兩種。

7.根據權利要求6所述的添加檸檬酸鈉促進銅綠假單胞菌降解芘的方法，其特征在于：

所述的氮源的用量為：當所述的環境為水體時，按5～10 g/L的量添加氮源；

所述的KH₂PO₄的用量為：當所述的環境為水體時，按2～2.5 g/L的量添加KH₂PO₄；

所述的MgSO₄?7H₂O的用量為：當所述的環境為水體時，按0.4～0.5 g/L的量添加MgSO₄?7H₂O。

8.根據權利要求1或2所述的添加檸檬酸鈉促進銅綠假單胞菌降解芘的方法，其特征在于：

所述的環境為水體時，在水體中加入檸檬酸鈉、銅綠假單胞菌、無機鹽和氮源，于28～30℃、150～200 rpm的條件處理。

9.權利要求1～8任一項所述添加檸檬酸鈉促進銅綠假單胞菌降解芘的方法在環境修復中的應用。