[發明專利]懷遠白花玉石籽石榴無性快速培育方法

在審

• 申請號: 201811281703.0
• 申請日: 2018-10-31
• 公開（公告）號: CN109496840A
• 公開（公告）日: 2019-03-22
• 發明（設計）人: 錢晶晶;胡友軍;高青海
• 申請（專利權）人: 安徽科技學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京科家知識產權代理事務所(普通合伙) 11427
• 代理人: 陳娟

本發明公開了一種懷遠白花玉石籽石榴無性快速培育方法，以懷遠玉石籽石榴的莖尖、莖段及葉片為外植體，滅菌條件為0.1％HgCl₂，10min，愈傷組織誘導的培養基為MS+6?BA 2.0mg/L+NAA 1.0mg/L+35g蔗糖+5.5g瓊脂，誘導芽的培養基為WPS+6?BA 1.0mg/L+35g蔗糖+5.5g瓊脂，生根誘導培養基為WPS+IBA 0.8mg/L+35g蔗糖+5.5g瓊脂。本發明的培育方法有利于培養高質量的石榴種苗，提高石榴結果的數量和質量。

技術領域

本發明涉及果蔬培育技術領域，尤其涉及一種懷遠白花玉石籽石榴無性快速培育方法。

背景技術

懷遠石榴(Punicaceae，Punica L.)(石榴科(Punicaceae)石榴屬(Punica L.)植物)種類繁多、栽培歷史悠久、品質優異，久負盛名，是安徽省重要的經濟果樹之一。

玉石籽石榴(white peel pomegranate cultivar)是安徽省懷遠縣主栽的優良石榴品種之一，是石榴中唯一一種白花、白籽、白實的品種。其果實品質佳，含糖量高，口味純正，在國內外有較高的知名度。但在目前白花玉石籽石榴的繁殖始終局限于傳統的是扦插、分株等方法，易出現病株、弱株、易早衰、提前減產和品種退化現象等諸多問題；另外在依靠扦插進行推廣優良品種的過程中由于受到季節及外界環境等客觀因素的制約，不能形成工廠化、標準化生產，導致優質種苗少，價格高，推廣受限,并且石榴品種繁育時間長，效率較低。

發明內容

基于背景技術存在的技術問題，本發明提出了一種懷遠白花玉石籽石榴無性快速培育方法，可以縮短植物的繁殖周期，避免了外界的光、水、養分和菌落的差異，有效的統一了植物的培養環境，避免外界干擾，有利于培養高質量的石榴種苗。

本發明的技術方案如下：

一種懷遠白花玉石籽石榴無性快速培育方法，包括如下步驟：

1)外植體選擇及預處理：選擇健壯的無病蟲害玉石籽石榴的新生腋芽、嫩莖段及新生葉片，作為組織培養的外植體，用流水沖洗10min后采用10mg/L GA₃浸泡30min后備用；

2)外植體接種：

腋芽接種：取10mg/L GA₃浸泡好的腋芽用75％酒精浸泡30sec后移入超凈工作臺，在超凈工作臺上，先用無菌水沖洗3遍，再用解剖針剝去芽鱗，后用0.1％HgCl₂消毒8min，無菌水沖洗5遍后切去腋芽下方木質部，接種于初代腋芽接種培養基上；

莖段接種：取10mg/L GA₃浸泡好的莖段用75％酒精浸泡30sec后移入超凈工作臺，在超凈工作臺上，先用無菌水沖洗3遍，后用0.1％HgCl₂消毒5min，無菌水沖洗5遍，切長1.0-1.5cm、只含1個節點的莖段，接種在初代莖段培養基上；

葉片接種：取10mg/L GA₃浸泡好的葉片用75％酒精浸泡30sec后移入超凈工作臺，在超凈工作臺上，先用無菌水沖洗3遍，后用0.1％HgCl₂消毒3min，無菌水沖洗5遍，將葉片切成1.0×1.0cm²小塊，并將葉片背面劃傷，將背面貼向培養基，接種于初代葉片接種培養基上；

3)增殖培養：上述腋芽接種25d、莖段接種20d、葉片接種40d后，將生長好外植體取切成1.5-2cm莖段，每段含有1-2個莖節，接種于增殖培養基中，在培養室培養35-40d；

4)生根培養：上述外植體增殖培養35-40d后，將外植體切除底部愈傷，然后接種于生根培養基中，在培養室培養45d；

5)煉苗：打開組培瓶蓋，進行煉苗，煉苗時間為3-5d；