[發明專利]一種酶法拆分制備(R)-1-(1-萘基)乙胺的方法

在審

• 申請號: 201811275317.0
• 申請日: 2018-10-30
• 公開（公告）號: CN109234352A
• 公開（公告）日: 2019-01-18
• 發明（設計）人: 汪斌;貢潔;翁居軾;楊鳳麗;陳舟;梁國斌;葉招蓮;劉維橋
• 申請（專利權）人: 江蘇理工學院
• 主分類號: C12P41/00
• 分類號: C12P41/00;C12P13/00;C12R1/72
• 代理公司: 常州佰業騰飛專利代理事務所(普通合伙) 32231
• 代理人: 高姍

1.一種酶法拆分制備(R)-1-(1-萘基)乙胺的方法，其特征在于，該方法為包括以下步驟：

(1)固定化CALB制備：配置南極假絲酵母脂肪酶B酶液，以下簡稱CALB，往酶液中加入環氧樹脂，在25℃下攪拌3h后，將環氧樹脂從酶液中分離，并用pH＝7.0緩沖液洗滌，真空干燥，得到固定化CALB，酶蛋白所占固定化酶的重量百分比為1.0-3.0％；

(2)反應體系A：在甲苯溶劑中，加入步驟(1)制得的固定化CALB、1-(1-萘基)乙胺消旋體、乙氧基乙酸乙酯，在40-70℃的溫度下恒溫反應9-15h，反應結束后固液分離，固定化CALB留在反應體系A中，液相從反應系統A中移出，得的液體備用；

(3)反應體系B：將步驟(2)得到的液體進入反應體系B中，加入固定化納米鈀、H₂壓力0.01-0.04MPa，在60-100℃的溫度下恒溫反應6-10h，反應結束后進行固液分離，液相再進入反應體系A中反應，反應結束后進行固液分離，所得液相再進入反應體系B中，如此循環1-5次，得循環反應后的液相；

(4)柱分離：將步驟(3)所得的循環反應后的液相以石油醚和異丙醇(1∶1)為流動相，柱層析分離油狀物，得到(R)-1-(1-萘基)乙胺乙酯；

(5)萃取：將步驟(4)所得的(R)-1-(1-萘基)乙胺乙酯用稀鹽酸溶液水解，再用甲苯萃取，靜置分層，水層用氨水調節pH值>10后用二氯甲烷萃取，將甲苯層和二氯甲烷層合并后減壓蒸餾，得到(R)-1-(1-萘基)乙胺。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，該方法為包括以下步驟：

(1)固定化CALB制備：配置20mL濃度為1.0mg/mL南極假絲酵母脂肪酶B酶液，以下簡稱CALB，往酶液中加入環氧樹脂150mg，在25℃下攪拌3h后，將環氧樹脂從酶液中分離，并用pH＝7.0緩沖液洗滌，真空干燥，得到固定化CALB，酶蛋白所占固定化酶的重量百分比為3.0％；

(2)反應體系A：在5mL的甲苯溶劑中，加入步驟(1)制得的250mg固定化CALB、2565mg的1-(1-萘基)乙胺消旋體、264mg的乙氧基乙酸乙酯，在40-70℃的溫度下恒溫反應9-15h，反應結束后固液分離，固定化CALB留在反應體系A中，液相從反應系統A中移出，得的液體備用；

(3)反應體系B：將步驟(2)得到的液體進入反應體系B中，加入固定化納米鈀、H₂壓力0.01-0.04MPa，在60-100℃的溫度下恒溫反應6-10h，反應結束后進行固液分離，液相再進入反應體系A中反應，反應結束后進行固液分離，所得液相再進入反應體系B中，如此循環反應5次，得循環反應后的液相；

(4)柱分離：將步驟(3)所得的循環反應后的液相以石油醚和異丙醇(1∶1)為流動相，柱層析分離油狀物，得到(R)-1-(1-萘基)乙胺乙酯；

(5)萃取：將步驟(4)所得的(R)-1-(1-萘基)乙胺乙酯用20mL濃度為5wt％的稀鹽酸溶液水解，再用甲苯萃取2次，每次20mL，靜置分層，水層用氨水調節pH值>10后用二氯甲烷萃取2次，每次20mL，，將有機層(甲苯層和二氯甲烷層)合并后減壓蒸餾，得到(R)-1-(1-萘基)乙胺。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)所述的環氧樹脂為Eupergit C250L,Sepabeads EP，Sepabeads HFA中的一種。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述納米鈀的粒徑為1-50nm；固定化載體為CaO，MgO，水滑石，復合氧化物，固體超強堿中的一種。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述復合氧化物為(Mg(Al)O)，所述固體超強堿為KCO₃/Al₂O₃、KOH/Al₂O₃、K₂O/Al₂O₃中的一種。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，反應體系A的反應溫度為50℃。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，反應體系B的反應溫度為70℃。