[發明專利]一種CHO細胞基因組內NW_006880285-1穩定表達蛋白質的應用有效
| 申請號： | 201811274680.0 | 申請日： | 2018-10-30 |
| 公開（公告）號： | CN109337927B | 公開（公告）日： | 2021-07-06 |
| 發明（設計）人： | 金堅;李華鐘;周松濤;陳蘊;段作營;龔笑海 | 申請（專利權）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12N15/85 | 分類號： | C12N15/85;C12N15/66;C12N5/10 |
| 代理公司： | 南京經緯專利商標代理有限公司 32200 | 代理人： | 何金錦 |
| 地址： | 214122 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 cho 細胞 基因組 nw_006880285 穩定 表達 蛋白質 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種CHO細胞在穩定表達蛋白質中的應用，其特征在于，所述CHO細胞的基因NW_006880285.1的第1235357堿基位點處導入蛋白質編碼基因；
所述位點附近1235285-1235307范圍內可被CRISPR/Cas9技術識別的5’-GAAAGAAGGTCTGATATCAAAGG-3’為靶序列。
2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述蛋白質為分子量小于160KDa的蛋白質。
3.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述蛋白質為功能性蛋白質、融合蛋白質中的一種。
4.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述蛋白質為抗體。
5.一種用于穩定表達蛋白質的重組供體載體，其特征在于，將蛋白質編碼基因插入到質粒中的5’arm和3’arm中間的區域，使該蛋白質編碼基因的核苷酸序列位于啟動子的下游并受其調控，得到重組CHO細胞表達質粒，即重組供體載體；所述5’arm和3’arm為CHO細胞基因NW_006880285.1的第1235357堿基附近第1235285-1235307范圍內可被CRISPR/Cas9技術識別的5’-GAAAGAAGGTCTGATATCAAAGG-3’的上下游同源臂。
6.一種用于穩定表達蛋白質的CHO重組細胞系，其特征在于，含權利要求5所述的重組供體載體。
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