[發(fā)明專利]用于高血壓相關(guān)藥物基因多態(tài)性位點檢測的引物組、試劑盒和方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201811272890.6 | 申請日: | 2018-10-29 |
| 公開(公告)號: | CN109182509B | 公開(公告)日: | 2022-05-06 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 朱陽進;孔繁仁;嚴慧;胡昌明;趙薇薇;于世輝 | 申請(專利權(quán))人: | 廣州金域醫(yī)學檢驗集團股份有限公司;廣州金域醫(yī)學檢驗中心有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/6883 | 分類號: | C12Q1/6883;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京超凡志成知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 齊云 |
| 地址: | 510000 廣東*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 用于 高血壓 相關(guān) 藥物 基因 多態(tài)性 檢測 引物 試劑盒 方法 | ||
1.一種用于高血壓相關(guān)藥物基因多態(tài)性位點檢測的引物組,其特征在于,其包括引物組合1-引物組合19;
其中,引物組合1為:SEQ ID NO.1-2所示的擴增引物和SEQ ID NO.40所示的檢測引物;
引物組合2為:SEQ ID NO.3-4所示的擴增引物和SEQ ID NO.41所示的檢測引物;
引物組合3為:SEQ ID NO.5-6所示的擴增引物和SEQ ID NO.42所示的檢測引物;
引物組合4為:SEQ ID NO.7-8所示的擴增引物和SEQ ID NO.43所示的檢測引物;
引物組合5為:SEQ ID NO.9-10所示的擴增引物和SEQ ID NO.44所示的檢測引物;
引物組合6為:SEQ ID NO.11-12所示的擴增引物和SEQ ID NO.45所示的檢測引物;
引物組合7為:SEQ ID NO.13-14所示的擴增引物和SEQ ID NO.46所示的檢測引物;
引物組合8為:SEQ ID NO.15-16所示的擴增引物和SEQ ID NO.47所示的檢測引物;
引物組合9為:SEQ ID NO.17-18所示的擴增引物和SEQ ID NO.48所示的檢測引物;
引物組合10為:SEQ ID NO.19-20所示的擴增引物和SEQ ID NO.49所示的檢測引物;
引物組合11為:SEQ ID NO.21-22所示的擴增引物和SEQ ID NO.50所示的檢測引物;
引物組合12為:SEQ ID NO.23-24所示的擴增引物和SEQ ID NO.51所示的檢測引物;
引物組合13為:SEQ ID NO.25-26所示的擴增引物和SEQ ID NO.52所示的檢測引物;
引物組合14為:SEQ ID NO.27-28所示的擴增引物和SEQ ID NO.53所示的檢測引物;
引物組合15為:SEQ ID NO.29-30所示的擴增引物和SEQ ID NO.54所示的檢測引物;
引物組合16為:SEQ ID NO.31-32所示的擴增引物和SEQ ID NO.55所示的檢測引物;
引物組合17為:SEQ ID NO.33-34所示的擴增引物和SEQ ID NO.56所示的檢測引物;
引物組合18為:SEQ ID NO.35-36所示的擴增引物和SEQ ID NO.57所示的檢測引物;
引物組合19為:SEQ ID NO.37-39所示的擴增引物和SEQ ID NO.58所示的檢測引物。
2.一種高血壓相關(guān)藥物基因多態(tài)性位點檢測的試劑盒,其特征在于,其包括權(quán)利要求1所述的19種引物組構(gòu)成的引物組。
3.如權(quán)利要求1所述的用于高血壓相關(guān)藥物基因多態(tài)性位點檢測的引物組或如權(quán)利要求2所述的高血壓相關(guān)藥物基因多態(tài)性位點檢測的試劑盒在制備用于高血壓相關(guān)藥物基因多態(tài)性位點檢測試劑中的應用,其特征在于,其包括如下步驟:
(1)使用權(quán)利要求1所述的引物組中的擴增引物對樣品進行PCR擴增,得到第一擴增產(chǎn)物;
(2)使用權(quán)利要求1所述的引物組中的檢測引物對經(jīng)堿性磷酸酶處理后的第一擴增產(chǎn)物進行單堿基延伸反應,得到第二擴增產(chǎn)物;
(3)采用飛行時間質(zhì)譜技術(shù)分析所述第二擴增產(chǎn)物的多態(tài)性。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應用,其特征在于,在步驟(1)中,進行PCR擴增的體系含有:引物組合1-引物組合19的擴增引物、Mg2+、dNTPs和Taq DNA聚合酶。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應用,其特征在于,在步驟(1)中,在步驟(1)中,進行PCR擴增的程序的退火溫度為:55-57℃。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應用,其特征在于,在步驟(2)中,進行單堿基延伸反應的體系含有:引物組合1-引物組合19的檢測引物和第一擴增產(chǎn)物。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應用,其特征在于,在步驟(2)中,進行單堿基延伸反應的程序的退火溫度為:51-53℃,退火時間為:4-6s。
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