[發(fā)明專(zhuān)利]一種引物探針組合物及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811269364.4
• 申請(qǐng)日: 2018-10-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109321569B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-04-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 程雪濤;吳子俠;金麗琴;張亞飛
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 邁杰轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究（蘇州）有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12N15/11
• 分類(lèi)號(hào): C12N15/11;C12Q1/6851
• 代理公司: 北京品源專(zhuān)利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

1.一種引物探針組合物，其特征在于，所述組合物包括四條探針及十二條引物，其中，所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1-12所示，所述探針的核苷酸序列如SEQ ID NO.13-16所示；

所述探針帶有熒光基團(tuán)和淬滅基團(tuán)，所述熒光基團(tuán)包括FAM和VIC，所述淬滅基團(tuán)包括BHQ；

所述引物的使用濃度為600-1000nM；

所述探針的使用濃度為200-500nM。

2.一種數(shù)字PCR擴(kuò)增體系，其特征在于，所述體系包括如下組分：1×的3D數(shù)字PCR預(yù)混液、93.33-133.33ng/μL的模板cDNA、600-1000nM的引物和200-500nM探針；

其中，所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1-12所示，所述探針的核苷酸序列如SEQID NO.13-16所示。

3.一種試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權(quán)利要求1所述的引物探針組合物或權(quán)利要求2所述的擴(kuò)增體系。

4.一種采用權(quán)利要求1所述的引物探針組合物、權(quán)利要求2所述的擴(kuò)增體系或權(quán)利要求3所述試劑盒制備檢測(cè)雄激素受體V7的藥物和/或試劑的應(yīng)用。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述檢測(cè)雄激素受體V7的方法包括如下步驟：

(1)提取檢測(cè)樣本的RNA，合成cDNA；

(2)采用權(quán)利要求1所述的組合物配制如權(quán)利要求2所述的擴(kuò)增體系；

(3)通過(guò)數(shù)字PCR儀采集熒光信號(hào)，分析得到拷貝數(shù)并計(jì)算百分表達(dá)量。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述樣本包括冷凍病理組織、新鮮病理組織或福爾馬林固定石蠟包埋組織中的任意一種。