[發(fā)明專利]表皮葡萄球菌在合成異丁酸中的應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811266841.1
• 申請日: 2018-10-29
• 公開（公告）號: CN109295114A
• 公開（公告）日: 2019-02-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張國霞;方舒婷;吳繼國;葉菊風(fēng);任悄悄;吳鎮(zhèn)東
• 申請（專利權(quán)）人: 南方醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號: C12P7/40
• 分類號: C12P7/40;C12R1/44
• 代理公司: 廣州市天河廬陽專利事務(wù)所(普通合伙) 44244
• 代理人: 胡濟(jì)元

本發(fā)明涉及表皮葡萄球菌在合成異丁酸中的應(yīng)用，其中所述的表皮葡萄球菌保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，其保藏號為GDMCC No：60458。本發(fā)明所述的表皮葡萄球菌具有較強(qiáng)的快速產(chǎn)異丁酸能力，每克干菌8小時(shí)可產(chǎn)異丁酸358.59～436.56μg。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及微生物，具體涉及葡萄球菌屬，特別是涉及表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)及其代謝物。

背景技術(shù)

異丁酸4個(gè)碳原子的支鏈脂肪酸,主要來源于脯氨酸、精氨酸、賴氨酸的降解終產(chǎn)物，同時(shí)也是合成支鏈纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸和脯氨酸等重要氨基酸的原料。異丁酸是消化道內(nèi)產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌等纖維降解菌的生長因子.能提高纖維分解菌的數(shù)量和對植物細(xì)胞壁的消化能力，從而提高纖維的消化率。還可以削弱它的前體氨基酸在乳腺組織的分解代謝。過剩的支鏈氨基酸可用于非必需氨基酸的生物合成或參與其它生物合成反應(yīng)，從而增加氮沉積。使微生物蛋白的合成增加，提供營養(yǎng)。可見，異丁酸在人體和動(dòng)物腸道中都是較必需的有益因子。但是異丁酸的含量決定著其功能的發(fā)揮，所以尋找能夠產(chǎn)生異丁酸的資源非常重要。目前絕大多數(shù)研究成果都是菌群和腸組織的功效，高效產(chǎn)異丁酸的單一自然菌種資源非常少。

現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道中，產(chǎn)異丁酸的主要微生物有大腸桿菌、芽孢桿菌、釀酒酵母、惡臭假單胞菌、梭桿菌屬的細(xì)菌、擬桿菌屬、產(chǎn)黑色素類桿菌、消化鏈球菌、鏈球菌科的部分細(xì)菌和乳酸乳球菌等，這些資源中有一些是重組微生物。它們產(chǎn)生異丁酸的時(shí)間需要24-96小時(shí)不等，所產(chǎn)的異丁酸的量約為幾十毫摩爾。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題的是提供表皮葡萄球菌的用途。

上述表皮葡萄球菌的用途具體是：

表皮葡萄球菌在合成異丁酸中的應(yīng)用，其中所述的表皮葡萄球菌保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，其保藏號為GDMCC No：60458。

上述應(yīng)用中，所述的表皮葡萄球菌的培養(yǎng)方法如下：

取健康人的糞便加入PBS溶液溶解并使得糞便在溶液中的濃度為10g/L，靜置，取上清液2ml，加入100mlECY液體培養(yǎng)基，在37℃條件下密閉厭氧靜止培養(yǎng)，觀察到有明顯的渾濁后轉(zhuǎn)至ECY固體培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)1天，挑取快速生長的菌落在所述ECY固體培養(yǎng)基上進(jìn)行純化，得到單菌落，即所述表皮葡萄球菌菌株；將得到的菌株保存在體積濃度為15％的甘油水溶液中，備用；其中，

所述的ECY固體培養(yǎng)基常溫下每1000ml由以下原料組成：

水蘇糖2.4-4.4g，胰酪胨5.8-7.8g，酵母粉3.2-5.2g，氯化鈉3.7-5.3g，KH₂PO₄0.5-0.7g，MgSO₄·7H₂O 3.0-4.5g，無水乙醇3.8-4.0ml，瓊脂粉15.3g-19.6g，其余為蒸餾水；

所述ECY固體培養(yǎng)基的pH值為6.1～7.5；

所述的ECY液體培養(yǎng)基每1000ml由以下原料組成：

水蘇糖2.4-4.4g，胰酪胨5.8-7.8g，酵母粉3.2-5.2g，氯化鈉3.7-5.3g，KH₂PO₄0.5-0.7g，MgSO₄·7H₂O 3.0-4.5g，無水乙醇3.8-4.0ml，其余為蒸餾水；

所述ECY液體培養(yǎng)基的pH值為7.2±0.1。

上述應(yīng)用中，所述的異丁酸的合成方法如下：