[發明專利]湖水水樣中鉛離子檢測方法用探針集成功能核酸修飾電極的制備方法

在審

• 申請號: 201811265189.1
• 申請日: 2016-05-31
• 公開（公告）號: CN109060903A
• 公開（公告）日: 2018-12-21
• 發明（設計）人: 申曉萍;王超穎;洪華;張愛平;施筱迪;王海天;洪昱;王紅衛
• 申請（專利權）人: 中華人民共和國南通出入境檢驗檢疫局
• 主分類號: G01N27/26
• 分類號: G01N27/26;G01N27/333;G01N27/327;G01N27/48
• 代理公司: 南通市永通專利事務所(普通合伙) 32100
• 代理人: 葛雷

1.一種湖水水樣中鉛離子檢測方法用探針集成功能核酸修飾電極的制備方法，其特征是：所述湖水水樣中鉛離子檢測方法是：將制備好的修飾電極浸入到一系列加有不同濃度的鉛離子標準水樣的緩沖溶液中浸泡25 min后，用上述緩沖溶液清洗電極；以0.1 M的NaClO₄作為支持電解質溶液，進行DPV掃描測試，測試參數為：調整時間為50 ms，間隔時間為0.5 s，調制振幅為50 mV，階躍電勢為5 mV，掃描范圍為0.1～0.6V；以DPV峰電流為縱坐標，鉛離子濃度為橫坐標，繪制標準工作曲線；

采用湖水作為樣品，湖水經過活性炭脫色后用0.22 μm濾膜過濾，再以15000轉/min離心后，取上清液進行測定；將50 μL處理好的湖水水樣加入到上述緩沖溶液中，按照上述測定步驟操作，測定其DPV峰電流，根據DPV峰電流變化率 (I₀-I)/I₀，由標準曲線擬合的線性方程可以計算出水樣中鉛離子濃度；

所述探針集成的功能核酸修飾電極的制備方法是：將金納米粒子修飾電極置于加有1μM巰基修飾的17E DNAzyme的緩沖溶液中自組裝約12小時；所述緩沖溶液是pH 7.5、含140mM NaCl和5 mM KCl的20 mM Tris-HCl溶液；取出電極用所述緩沖溶液清洗，再將電極置入到加有1mM巰基己醇的上述緩沖溶液中鈍化，用同樣的緩沖溶液清洗除去未組裝的巰基乙醇；最后將電極轉移到含有1 μM的底物17DS溶液中組裝；所述底物17DS的3’端修飾二茂鐵探針分子；再用上述緩沖溶液洗滌電極，得到探針集成的功能核酸修飾電極。