[發(fā)明專利]一種“熒光-穩(wěn)定同位素”雙模態(tài)對三硝基甲苯的檢測方法

有效

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• 申請日: 2018-10-29
• 公開（公告）號: CN109765203B
• 公開（公告）日: 2021-07-16
• 發(fā)明（設計）人: 呂弋;胡建煜;劉睿
• 申請（專利權(quán)）人: 四川大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明的目的是提供一種對三硝基甲苯（TNT）的“熒光?穩(wěn)定同位素”雙模態(tài)檢測方法。該分析方法包括聚胸腺嘧啶?核酸適配體探針（AptTNT?T30）和熒光檢測和穩(wěn)定同位素檢測雙模態(tài)檢測。本發(fā)明的原理是：TNT核酸適配體（AptTNT）序列可以和目標TNT分子特異性結(jié)合進行端基保護，避免核酸外切酶切割，可以使5’端的聚胸腺嘧啶序列（T30）作為模板原位合成銅納米粒子。合成的銅納米粒子可以進行雙模態(tài)的檢測：在熒光檢測模式下可進行快速熒光檢測;銅納米粒子硝酸消解后，在穩(wěn)定同位素檢測模式下可用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀進行高靈敏穩(wěn)定定量分析，可以分別滿足TNT的實地快速檢測和高靈敏準確檢測。

技術領域

本發(fā)明屬于分析化學的檢測領域，涉及爆炸物的熒光（Fluorimetry）和穩(wěn)定同位素(Metal stable isotope)傳感領域，特別涉及一種基于聚胸腺嘧啶脫氧核糖核酸（Poly-T ssDNA）作為模板原位合成銅納米粒子（CuNPs）的熒光-穩(wěn)定同位素雙模態(tài)對三硝基甲苯（TNT）檢測方法。

背景技術

三硝基甲苯（TNT），作為最典型的化學爆炸物之一，已經(jīng)廣泛應用于軍工、礦業(yè)、反恐和民用領域。同時，TNT屬于高度有毒物質(zhì)，對動植物和人體有嚴重的毒理學威脅。廣泛應用導致的TNT對土壤、水體的嚴重污染威脅著生態(tài)系統(tǒng)生存。另外，日益嚴峻的全球安全形勢和反恐需求，對于TNT的快速、高靈敏分析檢測也越發(fā)重要。

目前對TNT的檢測主要使用離子遷移率光譜法、高效液相色譜法和表面增強拉曼光譜法等，這些方法雖然得到了長期發(fā)展，但仍面臨著成本高、耗時長、前處理環(huán)節(jié)復雜和靈敏度差強人意的問題，限制了實際使用場景。近年來報道較多的對TNT的熒光檢測法，利用熒光材料對TNT的快速特異性響應，可以實現(xiàn)快速實地檢測。但傳統(tǒng)熒光光譜法受限于光漂白效應和基質(zhì)效應，難以實現(xiàn)長時間穩(wěn)定準確定量分析，因此在對TNT分析領域，仍然需要一種既可以對TNT實現(xiàn)快速便捷實地檢測，又可以保證準確穩(wěn)定高靈敏定量的方法。

近年來， Poly-T ssDNA作為模板原位還原合成銅納米粒子的熒光傳感方法因其操作簡單、耗時較短、成本較低、無需額外化學標記、適用范圍廣等特點已經(jīng)引起廣泛關注，成功建立了對核酸、核酸酶、蛋白質(zhì)、金屬離子和生物小分子的檢測方法。相較于熒光傳感，PolyT ssDNA在還原劑抗壞血酸(Ascorbic acid, AA)的作用下直接原位特異性的還原生成具有熒光性質(zhì)的CuNPs，通過熒光強度的快速響應進行實地分析。同時銅納米粒子硝酸消解后也可利用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（Inductive Coupled Plasma MassSpectrometry, ICPMS）進行穩(wěn)定同位素檢測，利用ICPMS檢出限低（大部分元素都可以達到pg mL^-1級別）、基體效應小、線性范圍廣（高達九個數(shù)量級）、穩(wěn)定性優(yōu)異的優(yōu)點可以實現(xiàn)相較于熒光傳感更高靈敏度更高穩(wěn)定性的準確分析。

本發(fā)明將以上對PolyT CuNPs 雙模態(tài)檢測方法引入TNT分析檢測中，構(gòu)筑了一種既可以在熒光檢測模式下實現(xiàn)快速實地分析；又可以在穩(wěn)定同位素檢測模式下實現(xiàn)高靈敏穩(wěn)定的定量分析（檢出限可達到0.32ppt）的TNT雙模態(tài)檢測方法。因而，提高了TNT檢測的適用范圍，提供了一種新的分析方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種 “熒光-穩(wěn)定同位素”雙模態(tài)檢測方法，及其在TNT檢測方面的應用。