[發明專利]胱抑素C測定試劑盒及其制備方法和檢測方法

有效

• 申請號: 201811260548.4
• 申請日: 2018-10-26
• 公開（公告）號: CN109358009B
• 公開（公告）日: 2021-08-10
• 發明（設計）人: 李海軍;陶成剛;李建奎;黃鍇;陳肯;李小玉
• 申請（專利權）人: 武漢百德瑞康生物技術有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31
• 代理公司: 武漢藍寶石專利代理事務所(特殊普通合伙) 42242
• 代理人: 廉海濤

1.一種胱抑素C測定試劑盒，其特征在于，所述胱抑素C測試試劑盒的檢測波長為530nm-550nm，分析方法為兩點終點法和采用非線性Spline模式或Logit-Log5P模式修正標準曲線，包括Cys-C校準品、試劑R1和試劑R2，所述校準品濃度分別為0.5mg/L、1mg/L、2mg/L、4mg/L和8mg/L，所述試劑R1為由以下濃度的各組分制備而成的水溶液：

其中，所述聚乙二醇的分子量范圍為5500-7500；

所述試劑R2為由以下濃度的各組分制備而成的水溶液：

所述試劑R1和所述試劑R2中的生物防腐劑均為Proclin300，所述蛋白保護劑為牛血清白蛋白，所述抗人Cys-C抗體膠乳顆粒選自元升生物科技(上海)有限公司生產的抗人Cys-C抗體膠乳顆粒；

檢測使用時，所述試劑R1和試劑R2的體積比為4:1。

2.根據權利要求1所述的胱抑素C測定試劑盒，其特征在于，所述試劑R1為由以下濃度的各組分制備而成的水溶液：

所述試劑R2為由以下濃度的各組分制備而成的水溶液：

3.一種權利要求1或2所述的胱抑素C測定試劑盒的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

配制試劑R1：按照權利要求1或2所述的試劑R1的組成稱量各組分，將甘氨酸用4/5倍的預配制溶液總體積的純化水攪拌使之溶解，加入氫氧化鈉調節溶液的pH值至8.60±0.1，再依次加入聚乙二醇和生物防腐劑，溶解，定容，至于2～8℃儲存；

配制試劑R2：按照權利要求1或2所述的試劑R2的組成稱量各組分，將甘氨酸用4/5倍的預配制溶液總體積的純化水攪拌使之溶解，加入氫氧化鈉調節溶液的pH值至8.60±0.1，加入生物防腐劑，溶解，再蛋白保護劑和抗人Cys-C抗體膠乳顆粒，混勻，定容，至于2～8℃儲存；

再將制備獲得的試劑R1和試劑R2按照體積比4:1的比例分別分裝，再將分裝后的試劑R1和分裝后的試劑R2一對一組裝，即得。

4.一種權利要求1或2所述的胱抑素C測定試劑盒的檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：

選取如下表所示的試驗條件：

主波長	530nm～550nm	副波長	無
分析方法	兩點終點法	反應時間	10min
校正方法	Spline	反應方向	向上

按照下表所示的步驟進行測試：

計算：采用6點獲取標準曲線：第1管取蒸餾水，輸入值為0.00g/L，第2管～6管分別取校準品，輸入測試獲取的各校準品的吸光度差值，以△A為縱坐標，以濃度為橫坐標，繪出標準曲線；采用非線性法Spline模式或Logit-Log5P模式修正該標準曲線，獲得修正后的標準曲線；根據該修正后的標準曲線計算測定的待測樣本中的胱抑素C的含量。