[發明專利]一種檢測動物血液皮質醇的試劑盒

在審

• 申請號: 201811254343.5
• 申請日: 2018-10-26
• 公開（公告）號: CN109444408A
• 公開（公告）日: 2019-03-08
• 發明（設計）人: 高翠華;冉鵬
• 申請（專利權）人: 成都普利泰生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/552
• 分類號: G01N33/552;G01N33/577
• 代理公司: 成都嘉企源知識產權代理有限公司 51246
• 代理人: 胡林

1.一種檢測動物血液皮質醇的試劑盒，其特征在于：包括皮質醇單克隆抗體包被的毛細管、堿性磷酸酶標記的皮質醇抗原類似物、催化堿性磷酸酶發光的化學發光底物、ANS鹽釋放劑、皮質醇校準品和清洗液。

2.根據權利要求1所述的一種檢測動物血液皮質醇的試劑盒，其特征在于：所述皮質醇單克隆抗體包被的毛細管是通過如下方法制成的：

步驟1，在毛細管內表面均勻包裹氨基；

步驟2，包被毛細管

首先用MES緩沖液溶解EDC，制成溶液Ⅰ；然后用溶液Ⅰ稀釋皮質醇單克隆抗體，制成包被液；最后用包被液包被經過步驟1處理后的毛細管，包被完成后倒去包被液，包被的溫度為35~40℃，包被時間為0.5～1h，包被的方式為將毛細管浸沒在包被液中；

步驟3，第一次清洗

用Tris-HCl緩沖液清洗毛細管，清洗完成后吹干毛細管內外表面液體；

步驟4，封閉

用封閉液封閉處理經過步驟3的毛細管，封閉處理完成后，倒去封閉液，封閉處理時間為1~5h，封閉處理溫度為15～40℃；

步驟5，第二次清洗

用清洗劑清洗經過步驟4處理后的毛細管，清洗完成后，吹干毛細管內外表面。

3.根據權利要求2所述的一種檢測動物血液皮質醇的試劑盒，其特征在于：步驟2中，所述MES緩沖液的pH=6.4~6.6，濃度為0.05~0.2M；所述溶液Ⅰ中EDC濃度為0.02~0.8 mg/mL；所述包被液中皮質醇單克隆抗體的濃度為2~20 ug/mL。

4.根據權利要求2所述的一種檢測動物血液皮質醇的試劑盒，其特征在于：步驟2中，所述MES緩沖液包括如下成分：

MES 0.05～1.5M

NaCl 0.05～1.5M

MgCl₂ 1～5mM

ZnCl₂ 0.01～0.1mM

BSA 0.2～1.5%

吐溫20 0.2～0.6%。

5.根據權利要求2所述的一種檢測動物血液皮質醇的試劑盒，其特征在于：步驟3中，Tris-HCl緩沖液的pH=7.4，濃度為25~100mM。

6.根據權利要求2所述的一種檢測動物血液皮質醇的試劑盒，其特征在于：步驟4中，所述封閉液包括如下成分：

BSA 1~5%

蔗糖 2~10%

Tris 20~200M

甘氨酸 0.05~0.5M

吐溫20 0.01~0.1%。

7.根據權利要求2所述的一種檢測動物血液皮質醇的試劑盒，其特征在于：步驟5中，所述清洗劑中包含Tris、NaCl、CHAPS和Trition 100，其中Tris的濃度為 25~200 mM，NaCl的質量百分比為0.5~1.5%，CHAPS的質量百分比為0.05~0.2%，Trition 100的體積百分比為0.05~0.2%。