[發明專利]用于鑒別三種孢子絲菌的熒光PCR引物、探針及檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201811253061.3
• 申請日: 2018-10-25
• 公開（公告）號: CN109207623B
• 公開（公告）日: 2021-03-02
• 發明（設計）人: 李福秋;張明瑞;呂莎;姚春麗;夏建新;牟妍;劉士瑞;周盈
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君;陳征

1.一種用于鑒別孢子絲菌的熒光定量PCR特異性引物和探針組合，其特征在于，所述熒光定量PCR特異性引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1-2所示；所述探針的核苷酸序列如SEQID NO.3-5所示，且三條探針標記的熒光基團不相同；所述孢子絲菌分別為球形孢子絲菌（Sporothrix globosa）、申克孢子絲菌（Sporothrix schenckii）和巴西孢子絲菌（Sporothrix bransiliensis）。

2.權利要求1所述的熒光定量PCR特異性引物和探針組合在制備鑒別球形孢子絲菌（Sporothrix globosa）、申克孢子絲菌（Sporothrix schenckii）和巴西孢子絲菌（Sporothrix bransiliensis）試劑盒或檢測試劑中的應用。

3.一種鑒別孢子絲菌的試劑盒，所述孢子絲菌分別為球形孢子絲菌（Sporothrix globosa）、申克孢子絲菌（Sporothrix schenckii）和巴西孢子絲菌（Sporothrix bransiliensis），其特征在于，含有權利要求1所述的熒光定量PCR特異性引物和探針組合，三條探針的5’標記熒光基團，3’標記淬滅基團。

4.如權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，以待測樣品總DNA為模板，利用權利要求1所述的熒光定量PCR特異性引物和探針組合進行實時熒光定量PCR，根據擴增曲線和熒光信號判定結果。

5.如權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，實時熒光定量PCR的25 μl反應體系為：

6.根據權利要求3-5任一所述的試劑盒，其特征在于，所述實時熒光定量PCR的反應程序為：95℃預變性10 min，1個循環；95℃變性15s，57-59℃退火15 s，45個循環。