[發明專利]一種蟻獅小分子肽及其分離純化方法和應用

有效

• 申請號: 201811252747.0
• 申請日: 2018-10-25
• 公開（公告）號: CN109485711B
• 公開（公告）日: 2021-07-20
• 發明（設計）人: 黃明星;韓雅莉
• 申請（專利權）人: 廣東工業大學
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435;C07K1/34;C07K1/18;C07K1/14;C07K1/36;A61K38/17;A61P35/00
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 林麗明

本發明公開了一種蟻獅小分子肽及其分離純化方法和應用。所述蟻獅小分子肽屬類I型熱休克因子結合蛋白，相對分子質量為9.6kDa，等電點為4.0，氨基酸殘基數是84，氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本發明利用離子交換技術從蟻獅中分離純化具有抗癌活性的多肽類成分，發現其中的兩個組分ALT1和ALT6對胃癌細胞MKN28具有明顯抑制效應。對組分ALT6進一步利用超濾、離子交換、分子篩等技術進行分離純化得到組分ALT614具有最高的抗癌活性，通過NCBI序列比對發現，所述蟻獅小分子肽ALT614與熱休克因子結合蛋白HSBP1具有同源性，相似度50～70%。所述蟻獅小分子肽可用于制備治療胃癌的藥物。

技術領域

本發明涉及蛋白質的分離純化技術領域，具體地，涉及一種蟻獅小分子肽及其分離純化方法和應用。

背景技術

蟻獅(Antlion)為蟻蛉的幼蟲，別名土牛、沙牛、地牯牛等，在分類上屬脈翅目(Neuroptera)蟻蛉科(Myrmeleontidae)。其發育為完全變態發育，蟲體略呈紡錘形，背面隆起，通體暗灰色或暗褐色；頭部大，方形，有鐮刀狀大腭，雙刺吸式口器；胸腹部常不易區分，前胸形成一可動的頸，腹部卵形，有鬃毛。蟻獅發育分三個齡期，各齡期可用頭寬和口器長度來區分；同一齡期個體的大小受發育期內食物來源是否豐富等因素影響。蟻獅大多數種類在干旱沙地生活，能建造漏斗狀穴，靜待獵物經過，捕捉后迅速將其麻痹，并采用體外消化的方式吸取食物，吸食后將獵物殘體拋出陷井。

目前國內外關于蟻獅的研究都相對不多。國外對蟻獅的研究主要集中在分類學和昆蟲行為學方面。國內對蟻獅的研究除了以上兩個方面外，另外一個重要的方面就是作為中藥用于治療各種疾病。我國古書如《本草綱目》等早有將蟻獅入藥的記載；《本草求源》則稱沙牛可通竅利水，治淋，炒研同白糖湯下；《民間常用草藥匯編》則稱，地牯牛有退瘡管的作用；《陸川本草》則記載可治小兒風痰、痙攣、砂淋。

近年來醫學研究表明，蟻獅的提取物具有明顯緩解血栓形成的作用。初步的藥理、毒理實驗發現，其醇提物或水提物都可對大白鼠的血栓形成有顯著的抑制作用。此外，還能顯著延長凝血和出血時間，具有抗凝作用，還具有收縮外周血管效應和舒張心房肌的作用，說明蟻獅有可能開發成治療心血管疾病的新藥物。王穎娟等人在蟻獅多糖對小鼠炎癥模型影響的實驗研究中發現，蟻獅多糖對小鼠耳廓腫脹、瓊脂性肉芽組織增生、足跖腫脹有極顯著的抑制作用，對實驗性腹膜炎的抑制作用顯著，顯著降低小鼠的扭體反應，說明蟻獅多糖具有顯著的抗腫脹性炎癥、抗滲出性炎癥、抗增生性炎癥以及鎮痛作用。此外，還有相關研究表明蟻獅的共生菌會分泌多種對昆蟲有殺傷力的毒蛋白。

由上可知，蟻獅可治療多種疾病，用藥量小，而且對病理特征迥然不同的疾病亦有療效，只是人們對它的特殊作用還不太了解，治病的機理更是不清楚，其抗癌的有效成分也沒有任何相關報道，這就嚴重限制了蟻獅在臨床中的應用。

發明內容

本發明的目的是為了克服現有技術的上述不足，提供一種蟻獅小分子肽，其對各種胃癌細胞均具有高效抑制作用。

本發明的另一目的在于提供所述蟻獅小分子肽的分離純化方法。

本發明的另一目的在于提供所述蟻獅小分子肽在制備治療胃癌的藥物中的應用。

本發明的另一目的在于提供所述蟻獅小分子肽在制備抑制胃癌細胞增殖或生長的制劑中的應用。

為了實現上述目的，本發明是通過以下方案予以實現的：

一種蟻獅小分子肽，屬類I型熱休克因子結合蛋白，相對分子質量為9.6kDa，等電點為4.0，氨基酸殘基數是84，氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。通過序列比對發現ALT614與熱休克因子結合蛋白HSBP1具有同源性，相似度50～70％。

所述蟻獅小分子肽的分離純化方法，包括如下步驟：