[發明專利]用于準確測定人全血中四種免疫抑制劑類藥物濃度的試劑盒及檢測方法

在審

• 申請號: 201811248811.8
• 申請日: 2018-10-25
• 公開（公告）號: CN109406650A
• 公開（公告）日: 2019-03-01
• 發明（設計）人: 鄒繼華;沈敏;楊曉東;潘清清;王琳;李全樂;鄒炳德
• 申請（專利權）人: 美康生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 寧波市鄞州甬致專利代理事務所(普通合伙) 33228
• 代理人: 周民樂

1.用于準確測定人全血中四種免疫抑制劑類藥物濃度的試劑盒，其特征在于，包括：他克莫司、西羅莫司、依維莫司和環孢霉素A的校準品，他克莫司-¹³Cd₂、西羅莫司-d₃、依維莫司-d₄和環孢霉素A-d₄的內標，他克莫司、西羅莫司、依維莫司和環孢霉素A的質控品，樣本處理液，提取液，流動相和復溶液。

2.如權利要求1所述的用于準確測定人全血中四種免疫抑制劑類藥物濃度的試劑盒，其特征在于，所述校準品中他克莫司、西羅莫司、依維莫司和環孢霉素A均具有六個濃度梯度，其中所述他克莫司、西羅莫司、依維莫司六個濃度點相同，分別為2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL，環孢霉素A的六個濃度點分別為10ng/mL、50ng/mL、200ng/mL、500ng/mL、1000ng/mL、2000ng/mL。

3.如權利要求1所述的用于準確測定人全血中四種免疫抑制劑類藥物濃度的試劑盒，其特征在于，所述內標為含有他克莫司-¹³Cd₂、西羅莫司-d₃、依維莫司-d₄和環孢霉素A-d₄的甲醇溶液，且他克莫司-¹³Cd₂、西羅莫司-d₃和依維莫司-d₄在內標溶液中的濃度范圍均為8～30ng/mL，環孢霉素A-d₄在內標溶液中的濃度范圍為100～300ng/mL。

4.如權利要求1所述的用于準確測定人全血中四種免疫抑制劑類藥物濃度的試劑盒，其特征在于，所述質控品包括質控品I和質控品II，

所述質控品I組成包括：他克莫司：5～9ng/mL；西羅莫司：9～15ng/mL；依維莫司：9～15ng/mL；環孢素A：90～150ng/mL；

所述質控品II組成包括：他克莫司：10～18ng/mL；西羅莫司：15～25ng/mL；依維莫司：15～25ng/mL；環孢素A：180～280ng/mL。

5.如權利要求1所述的用于準確測定人全血中四種免疫抑制劑類藥物濃度的試劑盒，其特征在于，所述樣本處理液為濃度為0.1～0.3mol/L硫酸鋅水溶液；所述提取液為正己烷和乙酸乙酯的混合溶液，所述乙酸乙酯的體積百分比為50％～80％。

6.如權利要求1所述的用于準確測定人全血中四種免疫抑制劑類藥物濃度的試劑盒，其特征在于，所述流動相中流動相A為水溶液，流動相B為甲醇溶液，且流動相A和流動相B中均含有2～10mmol/L的乙酸銨或甲酸銨以及體積百分比為0.05-0.20％的甲酸或乙酸；所述復溶液為體積百分比為50％～100％的甲醇水溶液。

7.如權利要求1所述的用于準確測定人全血中四種免疫抑制劑類藥物濃度的試劑盒，其特征在于，所述校準品和質控品均為他克莫司、西羅莫司、依維莫司和環孢霉素A的混合物，且所述混合物為全血或全血凍干粉，或者甲醇溶液或甲醇溶液凍干粉。

8.如權利要求5所述的用于準確測定人全血中四種免疫抑制劑類藥物濃度的試劑盒，其特征在于，所述樣本處理液中硫酸鋅的濃度為0.3mol/L。

9.如權利要求5所述的用于準確測定人全血中四種免疫抑制劑類藥物濃度的試劑盒，其特征在于，所述提取液中乙酸乙酯的體積百分比為50％。

10.如權利要求6所述的用于準確測定人全血中四種免疫抑制劑類藥物濃度的試劑盒，其特征在于，所述流動相A和B中均加入乙酸銨和甲酸，且所述乙酸銨濃度為2mmol/L，所述甲酸體積百分比為0.1％。