[發明專利]一種阿巴帕肽的固相合成方法

在審

• 申請號: 201811247435.0
• 申請日: 2018-10-24
• 公開（公告）號: CN111087462A
• 公開（公告）日: 2020-05-01
• 發明（設計）人: 鄒正才;張孝清;楊凱;宋志春;包金遠
• 申請（專利權）人: 南京華威醫藥科技集團有限公司
• 主分類號: C07K14/635
• 分類號: C07K14/635;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明提供一種阿巴帕肽合成方法。本發明的所述的方法中，按照阿巴帕肽主鏈肽序分為說明書所述的一個片段的肽樹脂及兩個片段，分別先合成片段肽樹脂、及另外兩個片段，然后再將片段肽樹脂與兩個片段偶聯，切割樹脂得到最終產品的粗品。最后純化，成鹽最終獲得目標產品。各片段及片段樹脂的結構如說明書所述。本發明方法操作簡單，所得產品純度較高，方法工藝穩定、制備得到的阿巴帕肽純度可達99.5％以上，總收率較高，有利于工業化生產。

技術領域

本發明涉及多肽的合成技術，特別是利用固相合成技術實現阿巴帕肽的合成工藝。

背景技術

甲狀旁腺激素(PTH)是一種由甲狀旁腺主細胞分泌的，調節體內鈣和磷代謝的多肽類激素，其C端肽鏈與PTH-II受體結合可促進骨細胞凋亡、N端肽鏈與PTH-I受體結合可促進骨骼重建。Lilly公司以人甲狀旁腺素(hPTH)N-末端34個氨基酸殘基研制的用于治療骨質疏松癥的藥物阿巴帕肽(Abaloparatide)于2002年12月被FDA批準上市

阿巴帕肽的結構式為以下：

Ala-Val-Ser-Glu-His-Gln-Leu-Leu-His-Asp-Lys-Gly-Lys-Ser-Ile-Gln-Asp-Leu-Arg-Arg-Arg-Glu-Leu-Leu-Glu-Lys-Leu-Leu-Aib-Lys-Leu-His-Thr-Ala-NH2

阿巴帕肽，英文名稱為Abaloparatide，是由Radius Health公司研制的一種新型甲狀旁腺激素相關肽(PTHrP)，它是PTH-I受體強有力的選擇性激活劑，可以增加骨礦物質含量、骨密度以及骨強度，促進骨骼形成，已于2017年4月28日被FDA批準上市，其商品名稱為Tymlos。阿巴帕肽經皮下注射，用于治療處于骨折風險或對其它治療藥物無效的絕經后婦女的骨質疏松癥，可有效降低新發椎體和非椎體骨折率。與阿巴帕肽相比，阿巴帕肽能夠更好的降低骨折率和高鈣血癥發生率

采用液相法合成阿巴帕肽由于操作繁雜、合成周期長而暫時未見報道。目前阿巴帕肽合成的有關專利如下：

1)固相逐級合成法。專利US6921750B2公開了Boc策略保護氨基酸及采用TFA切除Boc保護基，通過固相法逐個連接氨基酸。最后采用危險性較高氫氟酸對肽樹脂進行裂解，反應收率較低。

2)固相片段合成法。專利CN106146648A將阿巴帕肽分割成三個肽樹脂片段獨立合成，隨后將肽片段2、肽片段3與片段1肽樹脂進行連接。該方法在氨基酸縮合時氨基酸與樹脂投料量的摩爾比值為3:1，在肽片段進行縮合時肽片段2和3與肽樹脂片段1投料量的摩爾比值為5:1，造成消耗大量原料，導致生產成本增加，三廢增加。專利CN106146648A將主鏈分成三個片段，按照阿巴帕肽的氨基酸序列從C端至N端的順序編號，分別獨立合成片段[20-34](即專利中的片段[1-15])、片段[12-19](即專利中的片段[16-23])和片段[2-11]肽樹脂(即專利中的片段[24-33])，然后再將這多肽片段連接最終得到缺失Ala氨基酸的產品。該發明的縮合工藝采用有機強堿DIEA，容易造成消旋，雜質多，粗品純度不高。專利CN108047329A采用液相合成方法，同時合成二肽片段三個Fmoc-Thr(OtBu)-Ala-OH、Fmoc-Lys(Boc)-Gly-OH、Fmoc-Ala-Val-OH和四肽片段一個Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Glu(OtBu)-OH，再以氨基樹脂作為固相合成的載體，按照阿巴帕肽的氨基酸序列從C端至N端依次縮合α依次縮合帶有Fmoc保護基的全保護氨基酸和所合成的二肽片段、四肽片段，較固相逐級合成法減少了6步固相縮合反應。缺點是片段多，操作麻煩，反應步驟較多。

綜上所述，現有阿巴帕肽的合成方法，總收率基本在15-45％，存在雜質多、氨基酸消旋、純化困難、收率低等問題，尚未見比較適合工業化生產的技術方案。為此，本發明對阿巴帕肽的合成方法進行了研究，從而得到了本發明的技術方案。

發明內容