[發明專利]一種鑒別阿膠及含阿膠制品中豬皮源性成分的多肽

有效

• 申請號: 201811243273.3
• 申請日: 2018-10-24
• 公開（公告）號: CN109280077B
• 公開（公告）日: 2022-04-29
• 發明（設計）人: 張曉梅;張鴻偉;王培鋒;徐彪;趙雪
• 申請（專利權）人: 山東出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K7/08;C07K14/00;G01N27/62
• 代理公司: 北京市誠輝律師事務所 11430
• 代理人: 唐寧

1.一條多肽在制備檢測阿膠及含阿膠制品中豬皮源性成分的檢測產品中的應用，所述的含阿膠制品包括阿膠糕、阿膠膏、阿膠漿、阿膠口服液、阿膠糖、阿膠補血顆粒，所述的多肽的序列為：

肽段36：SEQ ID NO.36：VIQLEAK；

所述的檢測為從驢皮阿膠、豬皮膠、牛皮膠、馬皮膠、騾皮膠樣本中檢測樣本中是否包含豬皮膠。

2.一種檢測阿膠及含阿膠制品中是否含有豬皮源性成分的檢測方法，所述方法包括如下步驟：

步驟（1），對待測樣本進行質譜前處理，獲得待測多肽濾液：

步驟（2），通過質譜法檢測步驟（1）獲得的多肽濾液，檢測待測樣本中是否含有權利要求1所述肽段的質譜峰；

步驟（1）所述的對待測樣本進行質譜前處理，獲得待測多肽濾液的步驟如下：

（1）將待測樣品均質成粉末狀態，稱取0.1g~0.5g阿膠樣品或1.0~2.0g含阿膠制品，加入1% NH₄HCO₃溶液，超聲處理10~30min使樣品完全溶解，定容至50mL；

（2）溶液過0.22μm濾膜得到濾液；

（3）取10~20μL1μg/μL的Trypsin酶溶液加入到100μL~200μL的上述濾液中，37℃酶解16-18小時，待上機檢測；

步驟（2）通過質譜法檢驗步驟（1）獲得的多肽濾液的方法是下述方法A或方法B：

方法A：采用AB SCIEX TripleTOF? 5600質譜檢測多肽濾液中是否含有權利要求1所述的肽段的質譜峰，

上機參數為：

流動相A：0.05~0.2% 甲酸-乙腈溶液，流動相B：0.05~0.2%甲酸-水，

流速：0.1~0.5mL/min，

TOF掃描范圍：100-3000Da，

正離子反應模式，GS1：35，GS2：45，Curtain Gas：35，ISVF：5500，TEM：500，DP：100，CE：10；

方法B：采用AB SCIEX 三重四級桿質譜檢測多肽濾液中是否含有權利要求1所述的肽段的質譜峰，

上機參數為：

流動相A：0.05~0.2%甲酸-乙腈，流動相B：0.05~0.2%甲酸-水，

流速：0.1~0.5mL/min，

電噴霧離子源，正離子反應模式，檢測方式：MRM，噴霧電壓：5500V，離子傳輸管溫度：475℃；鞘氣壓力：40；輔助氣壓力：6。