[發明專利]一種基于二茂鐵作為電子供體的適配體生物傳感器制備方法及應用

有效

• 申請號: 201811239957.6
• 申請日: 2018-10-23
• 公開（公告）號: CN110514713B
• 公開（公告）日: 2022-05-31
• 發明（設計）人: 郭業民;符家韻;史孝杰;孫霞
• 申請（專利權）人: 山東理工大學
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327;G01N27/48
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 鄧宇

1.一種基于二茂鐵作為電子供體的適配體生物傳感器的制備方法，其特征在于，所述制備方法是在表面修飾有氧化石墨烯-殼聚糖復合薄膜的絲網印刷碳電極表面固定二茂鐵標記的發卡適配體；所述發卡適配體的設計合成與標記是在適配體5′-AGCTTGCTGCAGCGATTCTTGATCGCCACAGAGCT-3′的3′端添加與5′端前幾個堿基對AGCTTG互補配對的堿基對CAAGCT，并在兩端分別標記氨基和二茂鐵，新合成的適配體鏈NH2-AGCTTGCTGCAGCGATTCTTGATCGCCACAGAGCTCAAGCT-Fc能夠有效形成發卡結構；所述適配體為廣譜性適配體，與丙溴磷、甲拌磷、水胺硫磷、氧樂果均有良好的特異性結合能力。

2.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述絲網印刷碳電極預處理的方法是將絲網印刷碳電極工作區域完全浸入0.5 M硫酸溶液中，在-1.0～+1.0 V電勢范圍內進行循環伏安掃描5圈，以得到性能穩定的電極。

3.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，氧化石墨烯-殼聚糖混合溶液的制備方法是氧化石墨烯溶液中加入EDC和NHS，室溫條件下孵育活化氧化石墨烯上的羧基，離心清洗后加入殼聚糖溶液，制備1 mg/mL氧化石墨烯-殼聚糖溶液。

4.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述生物傳感器用于測定有機磷農藥：將不同濃度的有機磷農藥標準品滴加在制備好的生物傳感器上，在室溫條件下孵育一定時間，使適配體與農藥充分結合；然后將該傳感器置于pH 7.4磷酸鹽緩沖溶液中執行電化學差分脈沖伏安法檢測。

5.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述生物傳感器的電化學信號來源于二茂鐵：在+0.7 V左右的電壓作用下，磷酸鹽緩沖溶液中的二茂鐵可產生電子，提供電化學信號。

6.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，適配體構象變化導致的不同電化學信號反映農藥濃度：目標農藥與適配體的特異性結合打開適配體的發卡結構，造成二茂鐵遠離電極表面，從而使其產生的電化學信號減小，進而監測目標物濃度。