[發明專利]一種從人參中提取純化竹節參皂苷Ⅵ的方法

有效

• 申請號: 201811236339.6
• 申請日: 2018-10-23
• 公開（公告）號: CN109336942B
• 公開（公告）日: 2020-08-28
• 發明（設計）人: 金永日;王紫琪;李緒文
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: C07J63/00
• 分類號: C07J63/00
• 代理公司: 北京天奇智新知識產權代理有限公司 11340
• 代理人: 龍濤

一種從人參中提取純化竹節參皂苷Ⅵ的方法，將人參粉碎，加入50％?70％甲醇水溶液超聲提取，提取液減壓濃縮，濃縮液用水稀釋，過大孔吸附樹脂柱純化，再經硅膠柱層析和制備液相進行分離純化，得到純度大于98％的竹節參皂苷Ⅵ。

技術領域：

本發明屬于天然藥物化學領域，具體涉及一種從人參中提取純化竹節參皂苷Ⅵ的方法。

背景技術：

人參為五加科(Araliaceae)人參屬植物人參的干燥根。現代研究表明，人參主要化學成分為皂苷、多糖、揮發油，有機酸，木質素，無機元素等，人參皂苷具有抗疲勞，活血化瘀，保護神經系統，抑制白血病細胞增殖，提高皮質激素水平，調節免疫功能，抗病毒，抗糖尿病等活性。人參皂苷主要分為達瑪烷型，齊墩果酸型和奧克梯隆型。其中達瑪烷型為四環三萜類物質，目前已分離得到的人參皂苷，絕大多數都是達瑪烷三萜類及其衍生物。竹節參，為五加科植物竹節參PanarjaPonicusC.A.Mey.的干燥根莖。具有散瘀止血，消腫止痛，祛痰止咳，補虛強壯之功效。常用于癆嗽咯血，跌撲損傷，咳嗽痰多，病后虛弱。文獻表明，竹節參中的皂苷多為齊墩果酸型，很少有達瑪烷型。竹節參皂苷Ⅳ和竹節參皂苷Ⅴ均屬于齊墩果酸五環三萜類，此類結構的皂苷在竹節參中的含量較多，二者在竹節參中的含量分別為1.98％、2.68％。竹節參總皂苷具有抗炎鎮痛的功效，以竹節參為主藥的復方竹節參片，在臨床上用于治療各項風濕疼痛病癥。竹節參總皂苷還可用于疫苗佐劑的研究，具有毒副作用小，取材廣泛等優勢。竹節參皂苷Ⅵ屬于達瑪烷四環三萜類，此類結構的皂苷在竹節參中含量較少，竹節參皂苷Ⅵ在竹節參中的含量約為0.19％，因此分離單體和活性研究的文獻較少。本發明提供了一種從人參中分離純化竹節參皂苷Ⅵ的方法，為達瑪烷型竹節參皂苷單體的分離提供了一種新的方法。

發明內容：

本發明的目的是提供一種從人參中提取分離高純度竹節參皂苷Ⅵ的方法。

為實現上述目的，本發明采用了以下技術方案：

將人參粉碎，加入有機溶劑的水溶液超聲提取，優選甲醇水溶液提取，合并提取液，減壓回收至無醇味，濃縮液用水稀釋，過大孔吸附樹脂柱純化，再經硅膠柱層析和制備液相進行分離純化；

所述有機溶劑水溶液的體積百分比為50％-70％；

所述大孔吸附樹脂吸附后用50％-70％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮、干燥；大孔吸附樹脂為D101、AB-8或者D4020。

所述硅膠柱層析的流動相為乙酸乙酯-乙醇-水＝6:1:0.1；

制備型高效液相色譜的流動相為乙腈-水＝29：71。

本發明的制備方法，具有高效、快速、產品純度高且有機溶劑用量較少，綠色環保等優點。

具體實施方式:

下面將結合具體實施例對本發明作進一步的說明。

實施例1:

取人參藥材2kg，粉碎，加入16升70％甲醇水溶液超聲提取5次，每次30分鐘，合并提取液，減壓濃縮，濃縮液用5倍水稀釋，過D101大孔吸附樹脂柱吸附，水洗至流出液無色，再用10倍柱體積70％乙醇水溶液洗脫，回收溶劑，減壓濃縮得到提取物。提取物以乙酸乙酯-乙醇-水＝6:1:0.1為流動相進行硅膠柱層析(展開劑：氯仿-甲醇-水＝16：5：1和正丁醇-乙酸乙酯-水＝4:1:5)，得到含竹節參皂苷Ⅵ的皂苷粉末3.2g。將此樣品用流動相溶解，在檢測波長203nm下，以乙腈-水＝29：71為流動相利用制備型高效液相色譜儀進行純化，收集含竹節參皂苷Ⅵ的流份，回收溶劑后凍干，得竹節參皂苷Ⅵ1.7g。將其核磁數據與文獻報道的竹節參皂苷Ⅵ核磁數據對比，確定其為竹節參皂苷Ⅵ，經高效液相色譜儀檢測，其純度為98.7％。核磁數據及色譜條件如下。