[發明專利]通用型嵌合抗原受體T細胞制備技術

在審

• 申請號: 201811230858.1
• 申請日: 2018-10-22
• 公開（公告）號: CN109694854A
• 公開（公告）日: 2019-04-30
• 發明（設計）人: 楊春暉;劉麗萍;曹衛;蔡松柏
• 申請（專利權）人: 亙喜生物科技（上海）有限公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;A61K35/17;A61P35/00
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 肖艷;徐迅

1.一種通用型嵌合抗原受體T細胞(CAR-T細胞)，其特征在于，所述CAR-T細胞具有以下特征：

(a)所述CAR-T細胞表達嵌合抗原受體CAR或表達T細胞抗原受體TCR，所述CAR靶向腫瘤細胞的標志物；和

(b)所述CAR-T細胞HLA-I與TCR(T cell receptor)的結合是被抑制的；

(c)所述CAR-T細胞的TCR表達是沉默的；

(d)所述的CAR-T細胞中的HLA-E是被上調或被過表達的。

2.如權利要求1所述的CAR-T細胞，其特征在于，所述CAR-T細胞表達外源性HLA-E SCT(HLA-E單鏈三聚體)。

3.如權利要求2所述的CAR-T細胞，其特征在于，所述的HLA-E SCT包括自身抗原肽，β2M和HLA-E重鏈。

4.如權利要求2所述的CAR-T細胞，其特征在于，所述的HLA-E SCT的結構如下式III所示：

L3-S-B-E (III)

式中，

各“-”獨立地為連接肽或肽鍵；

L3為任選的信號肽序列；

S為自身抗原肽元件；

B為突變的β2M元件；

E為HLA-E重鏈元件。

5.如權利要求1所述的CAR-T細胞，其特征在于，所述的HLA-I包括HLA-A、HLA-B、和/或HLA-C。

6.如權利要求5所述的CAR-T細胞，其特征在于，所述CAR-T細胞的β2m的基因表達是被沉默的，從而使得HLA-A、HLA-B、和/或HLA-C與TCR(T cell receptor)的結合被抑制。

7.如權利要求1所述的CAR-T細胞，其特征在于，所述CAR-T細胞表達外源性NK細胞抑制性受體的配體片段或抗體片段，較佳地，所述的NK細胞抑制性受體為CD94/NKG2A。

8.如權利要求1所述的CAR-T細胞，其特征在于，所述的CAR的結構如下式I所示：

L1-scFv-H1-TM1-C-CD3ζ(I)

式中，

各“-”獨立地為連接肽或肽鍵；

L1為任選的信號肽序列；

scFv為抗原結合結構域；

H1為任選的鉸鏈區；

TM1為跨膜結構域；

C為共刺激信號分子；

CD3ζ為源于CD3ζ的胞漿信號傳導序列。

9.一種制備權利要求1所述的CAR-T細胞的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(A)提供一待改造的T細胞；和

(B)對所述的T細胞進行改造，從而使得所述的T細胞表達CAR，并且所述T細胞中TCR是表達沉默的，并且所述T細胞中HLA-A、HLA-B、和/或HLA-C與TCR的結合被抑制，并且所述T細胞中的HLA-E是被上調或被過表達，從而獲得權利要求1所述的CAR-T細胞。

10.權利要求1所述的CAR-T細胞的用途，其特征在于，用于制備預防和/或治療癌癥或腫瘤的藥物或制劑。