[發(fā)明專利]一種同時快速檢測UGT1A1*6型與UGT1A1*28型基因多態(tài)性的試劑盒及方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811228568.3
• 申請日: 2018-10-22
• 公開（公告）號: CN109371127A
• 公開（公告）日: 2019-02-22
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 何順清;王家亮;楊欽予
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇美因康生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11
• 代理公司: 常州佰業(yè)騰飛專利代理事務(wù)所(普通合伙) 32231
• 代理人: 張福敏

1.一種同時快速檢測UGT1A1*6型與UGT1A1*28型基因多態(tài)性的試劑盒，其特征在于，用于檢測與腫瘤化療藥物伊立替康不良反應(yīng)相關(guān)基因UGT1A1*6型與*UGT1A1*28型基因多態(tài)性，包括樣本處理試劑、基因檢測試劑、陽性對照品和陰性對照品。

2.如權(quán)利要求1所述的一種同時快速檢測UGT1A1*6型與UGT1A1*28型基因多態(tài)性的試劑盒，其特征在于，基因檢測試劑采用PCR8聯(lián)管單人份預(yù)混分裝，包括：

檢測UGT1A1*6型引物對：SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.2；

檢測UGT1A1*6(211G＞A)型特異性探針SEQ ID NO.3-SEQ ID NO.4；

檢測UGT1A1*28(6TA＞7TA)型引物對：SEQ ID NO.5-SEQ ID NO.6；

檢測UGT1A1*28型特異性探針SEQ ID NO.7-SEQ ID NO.8；

探針核酸序列5’采用FAM、JOE、VIC、NED和ROX中的一種修飾，探針核酸序列3’采用MGB-NFQ基團(tuán)修飾。

3.如權(quán)利要求2所述的一種同時快速檢測UGT1A1*6型與UGT1A1*28型基因多態(tài)性的試劑盒，其特征在于，引物探針設(shè)計如下：

SEQ ID NO.1為UGT1A1 211G＞A上游引物：

5’-AGCTCCACCTTCTTATCTCTG-3’；

SEQ ID NO.2為UGT1A1 211G＞A下游引物：

5’-TTGTGCAGTAAGTGGGAACA-3’；

SEQ ID NO.3為UGT1A1 211G熒光探針：

5’-熒光基團(tuán)-TAAATGCTCGTCTCT-MGB-NFQ-3’；

SEQ ID NO.4為UGT1A1 211A熒光探針：

5’-熒光基團(tuán)-TAAATGCTCTGTCTCT-MGB-NFQ-3’；

SEQ ID NO.5為UGT1A1 6TA＞7TA上游引物：

5’-CATTAACTTGGTGTATCGATTGGT-3’；

SEQ ID NO.6為UGT1A1 6TA＞7TA下游引物：

5’-CAGCATGGGACACCACTG-3’；

SEQ ID NO.7為UGT1A1 6TA熒光探針：

5’-熒光基團(tuán)-TGCCATATATATATATATAGTAG-MGB-NFQ-3’；

SEQ ID NO.8為UGT1A1 7TA熒光探針：

5’-熒光基團(tuán)-GCCATATATATATATATATAAGTA-MGB-NFQ-3’。

4.如權(quán)利要求1所述的一種同時快速檢測UGT1A1*6型與UGT1A1*28型基因多態(tài)性的試劑盒，其特征在于，基因檢測試劑還包括：還包括用于內(nèi)部質(zhì)控的內(nèi)參引物對SEQ IDNO.11-SEQ ID NO.12和內(nèi)參探針SEQ ID NO.13，探針采用TaqMan探針，5’修飾CY5熒光基團(tuán)，3’采用BHQ淬滅基團(tuán)修飾。

5.如權(quán)利要求4所述的一種同時快速檢測UGT1A1*6型與UGT1A1*28型基因多態(tài)性的試劑盒，其特征在于，引物探針設(shè)計如下：

SEQ ID NO.11為內(nèi)參上游引物：

5’-CCTTCCTGCCACCGCTGAT-3’；

SEQ ID NO.12為內(nèi)參下游引物：

5’-TGCCTTCGCAACCATTCCCTTA-3’；

SEQ ID NO.13為內(nèi)參探針：

5’-熒光基團(tuán)-CGCTATGCTCCGCGCGCATCGTCTGCTC-BHQ-3’。

6.如權(quán)利要求1所述的一種同時快速檢測UGT1A1*6型與UGT1A1*28型基因多態(tài)性的試劑盒，其特征在于，基因檢測試劑還包括：具有抗PCR酶抑制劑的PCR預(yù)混液-TaqPathProAmp Master Mix，預(yù)混液包含經(jīng)修飾后的Hotstart-Taq聚合酶、UNG酶、ROX熒光校準(zhǔn)染料、dNTP、MgCl2、PCR buffer。