[發明專利]一種快速核酸提取方法

在審

• 申請號: 201811227897.6
• 申請日: 2018-10-22
• 公開（公告）號: CN109207475A
• 公開（公告）日: 2019-01-15
• 發明（設計）人: 李博安;張睿
• 申請（專利權）人: 博迪泰（廈門）生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 北京權智天下知識產權代理事務所(普通合伙) 11638
• 代理人: 李海燕

1.一種快速核酸提取方法，其特征在于：該方法包括以下步驟：

步驟一、裂解核酸樣品：將含有核酸的樣品加入裂解液中，形成核酸裂解液；

步驟二、吸附核酸：將載體加入所述核酸裂解液中，得到吸附核酸的載體；

步驟三、除去雜質：將吸附了核酸的載體在漂洗液中漂洗，除去除核酸外的雜質；

步驟四、擴增反應：將漂洗后的吸附有核酸的載體直接加入核酸擴增體系中進行擴增反應；

所述載體為纖維素濾紙。

2.根據權利要求1所述的一種快速核酸提取方法，其特征在于：所述纖維素濾紙的形狀為圓形或/和多邊形，所述纖維素濾紙的面積大小不超過9mm²。

3.根據權利要求1所述的一種快速核酸提取方法，其特征在于：所述裂解液包括鹽酸胍、異硫氰酸胍、Tris、Tween20、NaCl、TritonX-100、EDTA、PVP、檸檬酸鈉、月桂肌酸鈉以及β巰基乙醇中的至少3種，其中Tris的PH值為8.0。

4.根據權利要求3所述的一種快速核酸提取方法，其特征在于：所述裂解液包括1.5M鹽酸胍、4M異硫氰酸胍、50mM Tris、1％Tween20、100mM-150mM NaCl、0.5％TritonX-100、5mMEDTA、2％PVP、25mM檸檬酸鈉、0.5％月桂肌酸鈉以及0.1mMβ巰基乙醇中的至少3種。

5.根據權利要求3所述的一種快速核酸提取方法，其特征在于：所述裂解液分為DNA裂解液和RNA裂解液。

6.根據權利要求5所述的一種快速核酸提取方法，其特征在于：所述DNA裂解液為鹽酸胍、Tris、Tween20、NaCl、TritonX-100、EDTA以及PVP中的至少3種，其中Tris的PH值為8.0。

7.根據權利要求5所述的一種快速核酸提取方法，其特征在于：所述RNA裂解液為異硫氰酸胍、Tris、Tween20、NaCl、TritonX-100、EDTA、PVP、檸檬酸鈉、月桂肌酸鈉以及β巰基乙醇中的至少3種，其中Tris的PH值為8.0。

8.根據權利要求1-7任意一項所述的一種快速核酸提取方法，其特征在于：蛋白含量高的樣品先用蛋白酶K處理后再加入裂解液。

9.根據權利要求1-7任意一項所述的一種快速核酸提取方法，其特征在于：所述漂洗液包括5-20mM Tris和0.05-0.2％Tween-20，Tris的PH值為8.0。

10.根據權利要求1-7任意一項所述的一種快速核酸提取方法，其特征在于：所述擴增反應包括聚合酶鏈反應擴增和重組酶聚合酶恒溫擴增。