[發(fā)明專利]一種檢測血清/血漿中肌酸激酶同工酶的化學(xué)發(fā)光定量檢測試劑盒及其制備方法

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• 申請日: 2018-10-19
• 公開（公告）號: CN109490549A
• 公開（公告）日: 2019-03-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王立英;韓美玉;高威;孫成艷;何浩會
• 申請（專利權(quán)）人: 迪瑞醫(yī)療科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/543;G01N21/76
• 代理公司: 長春眾邦菁華知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 22214
• 代理人: 張偉

1.一種檢測血清/血漿中肌酸激酶同工酶的化學(xué)發(fā)光定量檢測試劑盒，其特征在于，包括：

1)鏈霉親和素包被的磁微粒；

2)生物素標(biāo)記的肌酸激酶同工酶抗體；

3)吖啶酯標(biāo)記的肌酸激酶同工酶抗體；

4)校準(zhǔn)品與質(zhì)控品；

所述校準(zhǔn)品與質(zhì)控品各含高、低兩個濃度點。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測血清/血漿中肌酸激酶同工酶的化學(xué)發(fā)光定量檢測試劑盒，其特征在于，所述鏈霉親和素包被的磁微粒中磁微粒與鏈霉親和素質(zhì)量比1：10-1：20。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測血清/血漿中肌酸激酶同工酶的化學(xué)發(fā)光定量檢測試劑盒，其特征在于，所述生物素標(biāo)記的肌酸激酶同工酶抗體中肌酸激酶同工酶抗體與生物素摩爾比1：5-1：20。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測血清/血漿中肌酸激酶同工酶的化學(xué)發(fā)光定量檢測試劑盒，其特征在于，所述吖啶酯標(biāo)記的肌酸激酶同工酶抗體中肌酸激酶同工酶抗體與吖啶酯摩爾比1：5-1：20。

5.一種權(quán)利要求1-4任意一項所述的檢測血清/血漿中肌酸激酶同工酶的化學(xué)發(fā)光定量檢測試劑盒的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)鏈霉親和素包被的磁微粒的制備

取磁微粒，用緩沖液清洗，然后稀釋，添加鏈霉親和素，37℃孵育18-24h后，置于磁分離架上分離磁珠，去上清，用緩沖液清洗，加入封閉液，37℃孵育18-24h后，置于磁分離架上分離磁珠，去上清，用緩沖液清洗，得到鏈霉親和素包被的磁微粒；

2)生物素標(biāo)記的肌酸激酶同工酶抗體的制備

取肌酸激酶同工酶抗體，用緩沖液置換肌酸激酶同工酶抗體保存液，然后用緩沖液稀釋，添加生物素，37℃孵育2-4h進(jìn)行標(biāo)記，然后加入封閉液，37℃孵育2-4h，然后蛋白純化儀純化，收集蛋白峰值，得到生物素標(biāo)記的肌酸激酶同工酶抗體；

3)吖啶酯標(biāo)記的肌酸激酶同工酶抗體的制備

取肌酸激酶同工酶抗體，用緩沖液置換肌酸激酶同工酶抗體保存液，然后用緩沖液稀釋，添加吖啶酯，37℃孵育2-4h進(jìn)行標(biāo)記，然后加入封閉液，37℃孵育2-4h，然后蛋白純化儀純化，收集蛋白峰值，得到吖啶酯標(biāo)記的肌酸激酶同工酶抗體；

4)制備標(biāo)準(zhǔn)品；

5)制備質(zhì)控品；

6)分裝上述鏈霉親和素包被的磁微粒、生物素標(biāo)記的肌酸激酶同工酶抗體、吖啶酯標(biāo)記的肌酸激酶同工酶抗體、校準(zhǔn)品與質(zhì)控品，組裝成成品。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的檢測血清/血漿中肌酸激酶同工酶的化學(xué)發(fā)光定量檢測試劑盒的制備方法，其特征在于，所述封閉液為含2-5％BSA的20mM PB緩沖液。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的檢測血清/血漿中肌酸激酶同工酶的化學(xué)發(fā)光定量檢測試劑盒的制備方法，其特征在于，所述緩沖液為20mM PB緩沖液。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的檢測血清/血漿中肌酸激酶同工酶的化學(xué)發(fā)光定量檢測試劑盒的制備方法，其特征在于，步驟1)中稀釋后的磁微粒的濃度為10mg/mL。

9.根據(jù)權(quán)利要求5所述的檢測血清/血漿中肌酸激酶同工酶的化學(xué)發(fā)光定量檢測試劑盒的制備方法，其特征在于，步驟1)中制備的鏈霉親和素包被的磁微粒用20mM PB緩沖液稀釋至10mg/mL。