[發明專利]一種泰山天花提取物及其在制備抗咽炎藥物中的應用

有效

• 申請號: 201811216296.5
• 申請日: 2018-10-18
• 公開（公告）號: CN108938680B
• 公開（公告）日: 2021-06-11
• 發明（設計）人: 朱孟娟;劉姍姍;孟麗;王麗;李壯;王威;徐圣東;周金洋
• 申請（專利權）人: 山東農業大學
• 主分類號: C07K14/375
• 分類號: C07K14/375;A61K36/07;A61P11/04;A61P31/04;A61K131/00
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 王志坤

1.一種泰山天花提取物的制備方法，其特征在于，步驟如下：

（1）取泰山天花子實體粉碎后加入去離子水0~8℃條件下抽提10~14h后，6000~10000rpm轉速離心15~25min后取上清液；

（2）向上清液中加入硫酸銨固體使上清中硫酸銨濃度達到70%；沉淀3~5h后離心，800~1200rpm離心10~20min后棄去上清，留沉淀；

（3）向沉淀中加入去離子水溶解，然后用分子量為3kD的透析膜透析10h，透析期間更換去離子水；

（4）向透析袋內的抽提液中加入1M pH為3.54的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液進行等電點蛋白沉淀，沉淀后離心，保留沉淀部分并透析；

（5）透析完成后的溶液進行Q-Sepharose陰離子交換梯度層析，收集500 mM洗脫組分中抗金黃色葡萄球菌的組分并進行透析，所述Q-Sepharose陰離子交換梯度層析的緩沖液為10 mM pH 7.4 HAc-NaAc，分別用濃度為200 mM、500 mM和 1M NaCl洗脫液進行洗脫，將收集的Q-Sepharose陰離子交換梯度層析并透析后的組分進行DEAE-cellulose 陰離子交換梯度層析，收集300 mM洗脫組分中抗金黃色葡萄球菌的組分并進行透析，所述DEAE-cellulose 陰離子交換梯度層析的緩沖液為pH 5.4 Tris-HCl，分別用濃度為150 mM、300mM和 1M NaCl洗脫液進行洗脫，將收集的DEAE-cellulose 陰離子交換梯度層析并透析后的組分進行Q-Sepharose陰離子交換線性層析，收集有抗金黃色葡萄球菌的組分并透析；所述Q-Sepharose陰離子交換線性層析，緩沖液為pH 4.6 Hac-NaAc，線性梯度為0-250mMNaCl；

（6）將透析完成后的溶液通過分子量為50kD的超濾膜進行超濾，完成后濃縮至溶液體積減少為50mL，保留濾膜上層溶液。

2.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（1）中泰山天花子實體，用粉碎機粉碎后按照1：10的質量比加入去離子水后，在4℃低溫抽提12h，然后8000rpm，離心20min，取上清。

3.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟（2）中加入硫酸銨后沉淀4h，之后轉速為1000rpm離心15min。

4.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟（4）中，醋酸-醋酸鈉緩沖溶液與提取液的體積比例為1:10，沉淀后12000 rpm 離心10 min，棄上清，保留沉淀部分。

5.如權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟（6）中，向超濾裝置中加入去離子水重復超濾濃縮的步驟。

6.權利要求1-5任一項制備方法得到的泰山天花提取物。

7.一種用于咽炎的藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物包括權利要求6所述的泰山天花提取物。

8.如權利要求7所述的一種用于咽炎的藥物組合物，其特征在于，該藥物組合物還包括藥學上可接受的輔料。

9.權利要求6所述的泰山天花提取物或權利要求7或8所述的藥物組合物在制備抗咽炎藥物中的應用。