[發明專利]治療免疫缺陷性疾病的組合物及其制備方法

在審

• 申請號: 201811215869.2
• 申請日: 2018-10-18
• 公開（公告）號: CN109172603A
• 公開（公告）日: 2019-01-11
• 發明（設計）人: 張明杰
• 申請（專利權）人: 深圳市漢科生命工程有限公司
• 主分類號: A61K35/17
• 分類號: A61K35/17;A61P17/00;A61P31/00;A61P35/00;A61P37/02;A61P31/06;A61P31/04;A61P31/18;A61P35/02;A61P19/02;A61P29/00;A61P13/12;A61P1/00
• 代理公司: 北京精金石知識產權代理有限公司 11470
• 代理人: 張黎

1.一種治療免疫缺陷性疾病的組合物，其包含NK細胞和/或其上清液及載體。

2.根據權利要求1所述的組合物，所述的NK細胞為HANK細胞，所述HANK細胞是通過擴增活化至少一種單核細胞細胞而獲得的，所述體單核細胞選自患者本人的外周血、與患者半相合的外周血、和無關的異體外周血、臍帶血，優選無關異體的外周血。

3.根據權利要求1所述的組合物，所述HANK細胞中CD56+NK細胞比例大于60％，優選大于80％；以效靶比例10:1計算，對K562靶細胞的殺傷率大于60％，優選大于80％。

4.根據權利要求1-3所述的組合物，所述的HANK細胞及其上清液通過以下方法獲得：

1)采集自體或異體健康人抗凝外周血，或臍帶血，用淋巴細胞分離液分離單核細胞；

2)在培養液中添加膜嵌合細胞因子，培養制備HANK細胞；

3)分離擴增活化的HANK細胞及其上清液。

5.根據權利要求4所述的組合物，所述的HANK細胞及其上清液通過以下方法獲得：

1)采集自體或異體健康人抗凝外周血，或臍帶血，分離單核細胞；

2)用NK細胞體外培養試劑盒制備HANK細胞，在X-Vivo15無血清培養液中添加膜嵌合細胞因子，37℃，5％CO₂孵箱培養10-18天，優選12-14天，更優選14天；

3)常溫4000rpm離心20min，分離HANK細胞及其上清液。

6.根據權利要求1所述的方法，所述的膜嵌合細胞因子包括4-1BBL及IL-21。

7.根據權利要求1-3所述的組合物，獲得的高HANK細胞中CD56+NK細胞比例大于80％；以效靶比例10:1計算，對K562靶細胞的殺傷率大于80％，支原體和細菌檢測陰性，內毒素≤1.0EU/ml。

8.一種制備治療免疫缺陷疾病藥物的方法，所述的方法為給予免疫缺陷病人含有權利要求1-3所述的組合物的藥物。

9.根據權利要求8所述的制備治療免疫缺陷疾病藥物的方法，所述的免疫缺陷疾病選自，感染、惡性腫瘤、自身免疫性疾病、蛋白丟失、免疫球蛋白合成不足、淋巴細胞丟失。

10.根據權利要求8所述的制備治療免疫缺陷疾病藥物的方法，所述的免疫缺陷疾病選自風疹、麻疹、麻風、結核病、巨細胞病毒感染、艾滋病病毒感染、球孢子菌感染霍杰金病、急性及慢性白血病、骨髓瘤等、系統性紅斑狼瘡、類風濕關節炎、腎病綜合征、蛋白丟失性腸病、免疫球蛋白合成不足、淋巴細胞丟失，優選為艾滋病或HIV感染。