[發(fā)明專利]一株55型腺病毒及其制備的疫苗制品

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811213808.2
• 申請日: 2018-10-18
• 公開（公告）號: CN109402067B
• 公開（公告）日: 2022-08-09
• 發(fā)明（設計）人: 高正倫;張海雯;劉巍;劉荷中
• 申請（專利權(quán)）人: 國科丹藍投資(北京)有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A61K39/235;A61P31/20
• 代理公司: 北京海虹嘉誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11129
• 代理人: 吳泳歷

本發(fā)明“一株55型腺病毒及其制備的疫苗制品”，屬于醫(yī)藥領域，其毒株編號為DW55?C20，保藏號為CGMCC No.13790。該毒株培養(yǎng)制得的純病毒液滴度可到7.8±0.5LgCCID_50/ml。制成的含有輔料的劑型，其病毒含量不低于4.5LgCCID₅₀/mL。制成的疫苗制劑，純度高，免疫活性高，具有良好的應用前景；本發(fā)明還提供了上述疫苗的制備方法，以及高效腺病毒毒株的篩選方法。

技術(shù)領域

本發(fā)明涉及病毒疫苗技術(shù)，更具體地涉及一株55型腺病毒及其制備的疫苗制品。

技術(shù)背景

腺病毒是一種常見的呼吸道和消化道病原體，可以引起各種癥狀表現(xiàn)，常在軍營和學校爆發(fā)流行。在美國軍隊，腺病毒引起的急性發(fā)熱呼吸道感染是一個重要的死亡原因。在健康的新兵中，超過50％的發(fā)熱呼吸道感染和超過90％的肺炎由腺病毒引起。美國新兵訓練營多次有腺病毒感染爆發(fā)流行，常有死亡病例報道，病死原因多為并發(fā)肺炎。根據(jù)國外文獻報道，腺病毒感染引起的肺炎如果不進行治療，死亡率可以高達50％。

腺病毒于1953年從人的增殖腺分離出來的，是一種無包膜的DNA病毒，可感染人和畜禽。腺病毒科分為哺乳動物腺病毒屬和禽類腺病毒屬，具有嚴格的寄主特異性，不感染其他動物，迄今共發(fā)現(xiàn)100余個血清型，其中人腺病毒有57種，分為7個亞群。

腺病毒是呈二十面體對稱的線性雙鏈病毒，病毒顆粒直徑約65～80nm，由蛋白衣殼、核心蛋白和DNA組成。蛋白衣殼由六鄰體(hexon)、五鄰體(penton)和纖突(fiber)三種主要的蛋白構(gòu)成，共252個殼粒，二十面體12個頂角的殼粒即為五鄰體，每個五鄰體上有1條纖突，剩下240個非頂角殼粒為六鄰體。蛋白衣殼的表面有四種小蛋白IIIa，VI，VIII和IX。病毒核心有六種結(jié)構(gòu)成分，分別是V、VII、TP、μ、IVa2和ATP，前五種與雙鏈DNA的基因組有關，ATP在病毒粒子裝配過程中至關重要的蛋白酶。Fiber蛋白的結(jié)構(gòu)包括球部、柄部和尾部，長度約為10～30nm，纖突球部有HAdV不同組別和型別的抗原表位，且不同的HAdV 血清型纖突的長度和彎曲度均不同。每個六鄰體蛋白是由基底部的五面體和塔尖的三角形組成，塔區(qū)有Loop1～Loop4四個環(huán)狀結(jié)構(gòu)構(gòu)成，其中Loop1結(jié)構(gòu)包括6個高變區(qū)，Loop2上有 1個高變區(qū)，7個高變區(qū)含有血清型特異的抗原決定簇。因此，編碼六鄰體和纖維蛋白的基因序列適用于人腺病毒血清型間基因差異分析。

歷史上，腺病毒7型和腺病毒4型腺病毒在美國軍隊中是引起發(fā)熱呼吸道感染的重要病原體。但是，近年來一個新的腺病毒亞型14型引發(fā)了一系列發(fā)熱呼吸道感染，而且腺病毒 14型成為美軍中腺病毒感染的主要亞型。在2004年到2007年期間,美國的傳染病監(jiān)測系統(tǒng)檢測到17次腺病毒14型疫情，其中十例(60％)來源于美國軍隊。上述情況說明14型腺病毒在美國軍隊發(fā)病率較高。2006-2007年間美國New York，Oregon，Washington,Texas等四個州共確診140例腺病毒14型腺病毒引起的呼吸系統(tǒng)感染，其中53例(38％)住院，24例(17％) 進入ICU，9例(5％)死亡。這些數(shù)字表明14型腺病毒具有較強的致病力。

腺病毒55型是由腺病毒14型演化而來，它的基因組的絕大部分區(qū)域和腺病毒14型高度同源，只有保護性抗原Hexon基因大部分來源于腺病毒11型，因此腺病毒55型為一種新型的重組腺病毒，該病毒的定型是由美國國立衛(wèi)生研究院人類腺病毒專業(yè)委員會主席、中國病原微生物生物安全國家重點實驗室客座教授Donald Seto于2010年正式定名。由于該病毒在抗原性及其編碼基因上與11型腺病毒更加接近，過去被錯誤的定名為11a型。事實上，腺病毒55型與腺病毒14型的同源性遠遠高于和11型的同源性，而且從過去的幾次在亞洲的流行特點來看，其感染特性和毒力也與腺病毒14型比較接近。