[發明專利]一種具有腫瘤引發靶向能力的藥物運載控釋系統及其制備方法

有效

• 申請號: 201811213454.1
• 申請日: 2018-10-17
• 公開（公告）號: CN109260175B
• 公開（公告）日: 2021-04-30
• 發明（設計）人: 李草;陳重銀;盧金博;羅畢矗;陳輝;萬立輝
• 申請（專利權）人: 湖北大學
• 主分類號: A61K9/51
• 分類號: A61K9/51;A61K47/04;A61K47/34;A61K31/704;A61P35/00
• 代理公司: 連云港聯創專利代理事務所(特殊普通合伙) 32330
• 代理人: 劉剛

1.一種具有腫瘤引發靶向能力的藥物運載控釋系統的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：

S1：制備巰基功能化中空介孔硅HMSN-SH；

S2：S-(2-氨乙巰基)-2-巰基吡啶鹽酸鹽的制備；

S3：雙硫功能化的介孔硅納米粒子(HMSN-SS-NH2)的制備；

將HMSN-SH在甲醇中超聲分散均勻，然后加入S-(2-氨乙巰基)-2-巰基吡啶鹽酸鹽，在室溫下反應；將產物離心，并用甲醇和去離子水超聲清洗數次，凍干后得到雙硫功能化的介孔硅納米粒子(HMSN-SS-NH2)；

其中所述HMSN-SH、甲醇和S-(2-氨乙巰基)-2-巰基吡啶鹽酸鹽的用量比為500mg：80-120ml：300-800mg；

S4：載藥納米粒子(DOX@HMSN-SS-NH-ND)的制備

S4-1：稱取納米金剛石(ND)，分散在去離子水中；用7.4的PBS調節pH到5-6，冰水浴4攝氏度，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺反應24小時后，得到活化ND；

S4-2：HMSN-SS-NH2分散在8.0的PBS中，加入阿霉素DOX，避光35攝氏度下反應24小時，加入步驟S4-1的活化ND，反應24小時，用7.4的PBS洗5次，用水洗一次；

S5:制備金剛烷封端的聚賴氨酸(AD-PLL-NH2)

稱取賴氨酸(H-Lys(z)-OH)于三口燒瓶中，加入重蒸的四氫呋喃(THF)，通氮氣保護；再稱取三光氣溶于重蒸的THF中，緩慢滴加至反應體系中，在50℃下劇烈攪拌反應4h，將反應生成的HCl氣體經過干燥塔導出至NaOH溶液中和；反應結束后，將得到的粗產物用石油醚沉淀三次，經過真空干燥以后，得到白色粉末狀的終產物N-芐氧羰基賴氨酸-N-羧基內酸酐zLL-NCA；

稱取zLL-NCA溶解在重蒸的DMF中，稱取金剛烷胺溶于重蒸的DMF中，迅速加入到燒瓶中；在氮氣保護下，室溫下反應30min后，再在40℃下反應72h，將得到的粗產物用乙醚沉淀三次后，真空干燥得到終產物金剛烷胺封端的N-芐氧羰基賴氨酸Ad-PzLL-NH2；

稱取Ad-PzLL-NH2于單口燒瓶中，加入三氟乙酸，冰水浴中攪拌15min，使得固體完全溶解；然后加入含33％溴化氫的乙酸溶液,反應1h；反應結束后，將反應粗產物用無水乙醚沉淀得到，然后用適量水溶解之后移入透析袋中，用去離子水透析三天，將所得溶液凍干得到終產物金剛烷胺封端的聚賴氨酸Ad-PLL-NH2；

S6：制備馬來酸酐化的聚賴氨酸(PLL-cit)

稱取S5所得金剛烷封端的聚賴氨酸和單甲基馬來酸酐，充分分散在去離子水中，氫氧化鈉溶液調pH為8～9；35攝氏度反應24小時，透析袋透析3天；

S7：聚賴氨酸層層自主裝修飾(DOX@HMSN-SS-NH-ND-PLL)

稱取DOX@HMSN-SS-NH-ND充分分散在去離子水中，向其中邊攪拌邊加入溶解了S5所得金剛烷封端的聚賴氨酸的水溶液；在30攝氏度下，反應15分鐘，清洗離心凍干；

S8：馬來酸酐化聚賴氨酸層層自主裝修飾(DOX@HMSN-SS-NH-ND-PLL-PLL(cit))

稱取DOX@HMSN-SS-NH-ND-PLL充分分散在去離子水中，滴加到溶解了PLL-cit的去離子水溶液中；在30攝氏度下，反應15分鐘，清洗離心凍干，即得。