[發明專利]趕黃草總黃酮含量測定方法

在審

• 申請號: 201811213370.8
• 申請日: 2018-10-09
• 公開（公告）號: CN109060696A
• 公開（公告）日: 2018-12-21
• 發明（設計）人: 袁葉飛;白雪
• 申請（專利權）人: 西南醫科大學
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明為趕黃草總黃酮含量測定方法，屬于中藥質量控制領域。本發明公開了一種趕黃草(含莖、葉、花)及其莖、葉、花等不同藥用部位的總黃酮含量測定方法。該方法為紫外分光光度法，以喬松素(或其7位羥基衍生物)為對照品，AlCl₃為顯色劑，在310nm波長下，測定梯度標準溶液吸光度，建立標準曲線，再測定待測液吸光度，根據標準曲線計算趕黃草及其不同部位總黃酮含量，與現有技術比較，本發明更具有合理性，測得的趕黃草及其不同藥用部位總黃酮含量的結果更準確。本發明適用于以趕黃草或其不同部位為原料和提取物的質量控制。

一、技術領域

本發明屬于中藥質量控制領域，涉及一種趕黃草及其不同部位總黃酮的含量測定方法。

二、背景技術

趕黃草是虎耳草科扯根菜屬植物扯根菜Penthorum chinense pursh.的干燥地上部分，為苗族民間草藥，主產于四川、貴州、湖南等地，為瀘州古藺道地藥材。趕黃草又名扯根菜、水澤蘭、水楊柳、山黃鱔。趕黃草性平、味苦、微辛、無毒、歸肝、腎經。具有清熱解毒、退黃化濕、活血散瘀、利水消腫之功效，廣泛用于治療各型肝炎、膽囊炎、脂肪肝等。

趕黃草含黃酮類、木脂素類、香豆素類、苯乙酮類、鞣質類、三萜類、有機酸類、酯類和揮發油等化學成分，其中以黃酮類化合物居多，是其主要成分，也是其功效成分。趕黃草中的黃酮類化合物主要由喬松素及其苷、槲皮素及其苷、山奈酚及其苷、柚皮素及其苷等組成。趕黃草總黃酮具有抗氧化、抗肝纖維化、緩解體力疲勞、治療酒精性肝損傷和非酒精性脂肪肝等作用。

目前雖有趕黃草總黃酮的含量測定報道，但都是以蘆丁為對照，以NaNO₂-Al(NO₃)₃-NaOH顯色，利用可見分光光度法，在510nm處測定吸光度，再通過蘆丁標準曲線計算趕黃草總黃酮的含量(1.中國實驗方劑學雜志，2012，18(18)：38-41；2.吉林畜牧獸醫，2018，39(6)：5-9；3.瀘州醫學院學報，2010，33(4)：370-372)，該方法中趕黃草總黃酮的吸收光譜圖與蘆丁存在極大差異，而且最大吸收波長也不一致(圖1)，因而其合理性及測定結果準確性有待商榷。

為使趕黃草總黃酮含量測定更具合理及結果更準確，本發明以喬松素(或其7位羥基衍生物)為對照，以AlCl₃顯色，利用紫外分光光度法建立趕黃草總黃酮含量測定方法。并對趕黃草(含莖、葉、花，下同)及其莖、葉、花等不同部位的總黃酮含量進行測定并比較，旨在為趕黃草合理開發和綜合利用提供依據。

三、發明內容

本發明旨在建立一種合理測定趕黃草總黃酮的含量方法。本發明方法簡便，準確，重復性好，為趕黃草及其不同部位質量控制提供了依據。

為實現上述目的，本發明采用的技術方案如下：

1.對照品溶液的配制 精密稱取喬松素(或其7位羥基衍生物)對照品12.5mg，加甲醇溶解，轉移至25mL容量瓶中，甲醇定容，即得濃度為0.5mg·mL^-1的對照品溶液。

2.供試品溶液的制備 精密稱取待檢藥材約1g至25mL圓底燒瓶中，加入10mL的55％乙醇溶液，加熱回流提取3次，每次1.5h，過濾，合并濾液，減壓濃縮，真空干燥得趕黃草提取物。提取物精密稱定，以甲醇溶解后，轉移至50mL容量瓶，加甲醇定容，即得供試品溶液。

3.標準曲線的繪制 分別精密移取喬松素(或其7位羥基衍生物)對照品溶液0.0，0.2，0.4，0.8，1.2，1.6，2.0mL于10mL容量瓶中，加入1mL的1％三氯化鋁甲醇溶液，甲醇定容至刻度，室溫放置10min，于310nm處測其吸光度，以濃度C(mg·mL)為橫坐標，吸光度A為縱坐標，繪制標準曲線，進行線性回歸分析。

4.趕黃草及其不同部位總黃酮含量測定