[發明專利]一種用于出土面食文物的鑒定方法

在審

• 申請號: 201811212168.3
• 申請日: 2018-10-17
• 公開（公告）號: CN109521105A
• 公開（公告）日: 2019-03-26
• 發明（設計）人: 朱展云;劉柳;楊軍昌
• 申請（專利權）人: 西北工業大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 貴州國防工業專利中心 52001
• 代理人: 符津銘

本發明屬于文物科技保護技術領域，具體涉及一種用于出土面食文物的鑒定方法。該方法首先對出土面食文物進行前處理，之后將處理后的樣品用固相萃取柱脫鹽、真空干燥后，溶于緩沖液；離心處理，收集上清液，進行高效液相色譜分析檢測，再然后進行串聯質譜分析；最后選擇蛋白數據庫進行檢索。采用本發明提出的一種用于出土面食文物的鑒定方法根據鑒定出殘留蛋白的來源，推斷出面食制作原料植物和發酵微生物，實現出土面食的鑒定。鑒定的準確性和成功率明顯提高。

技術領域

本發明屬于文物科技保護技術領域，具體涉及一種用于出土面食文物的鑒定方法。

背景技術

面食是以谷物粉為原料，經過發酵等工藝制作而成的食物，它的歷史可上溯到新石器時代。出土面食文物多發現于出土陶瓷器、金屬器內部。經過了長期保存，其外觀及內部含有的物質都會發生明顯變化，變化的程度與埋藏環境及年代有關。如果要確定某一出土容器中的文物究竟是否為古代面食，需要采用科學的手段進行鑒定，為研究我國古代飲食文化、植物馴化、古代食譜、社會結構等提供基礎信息。

本發明提出的方法以出土面食含有的古蛋白殘留物作為標志物，發現其制作原料種類及發酵微生物實現出土面食文物的精確鑒定。目前常用的鑒定方法是古植物形態學法，根據樣品中殘留的植硅石、淀粉粒等微觀植物遺存進行出土面食文物的鑒定。然而，這類遺存保存難度極大，在實際工作中鮮有成功案例。與本發明提出的方法相比，古植物形態學法準確度較低，并且無法揭示面食是否經過發酵，因而無法提供古代面食的加工工藝信息。此外，經過長期的降解，古蛋白殘留物比微觀植物遺存更可能保存下來，因此成功率更高。

發明內容

發明目的：一種用于出土面食文物的鑒定方法，以解決傳統面食文物鑒定技術準確度低、標志物不易保存的問題。

技術方案：一種用于出土面食文物的鑒定方法，包括以下步驟：

步驟一：樣品前處理，所述前處理方法為：提取并分離后的含古代面食標志物的凝膠樣品依次經過脫色-脫水-保溫-再脫水-酶解-干燥；

步驟二：將步驟一處理后的樣品用固相萃取柱脫鹽、真空干燥后，溶于緩沖液A；離心處理，收集上清液，進行高效液相色譜分析檢測，洗脫液為緩沖液B。所述緩沖液A為2％乙腈，0.1％甲酸；所述的緩沖液B為98％乙腈，0.1％甲酸；

步驟三：串聯質譜分析；

步驟四：數據庫檢索。

優選的，樣品脫色方法為：將含有出土面食文物樣品提取物的凝膠的著色區域切成多個約1mm²的小塊，分別用25mM的碳酸氫銨和50％的乙腈脫色2次，每次1h。

優選的，脫水處理時選用500μL 100％的乙腈。

優選的，高效液相色譜分析條件：用自動進樣器加入高效液相色譜的自制2cm C18柱及10cm C18柱(內直徑75μm)中。樣品加入的速率是15μL/min持續4min，洗脫速率為400nL/min持續91min，洗脫液濃度從2％線性增加到35％，然后在5min內線性增加到80％后持續8min，最終回到2％持續2min。

優選的，串聯質譜分析條件：質譜分辨率為60,000；串聯質譜分析采用碰撞誘導解離模式，標準碰撞能量為35％，離子碎片用線性離子阱檢測；10個豐度最高的離子計數在5000以上的母離子進入二級質譜分析；電噴霧電壓為1.5kV；采用自動增益控制來防止離子阱過滿，在離子阱中累積1×10⁴個離子來產生二級質譜；質荷比范圍是350-2,000Da。