[發明專利]一種多花黃精組織培養方法有效
| 申請號： | 201811209892.0 | 申請日： | 2018-10-17 |
| 公開（公告）號： | CN109169286B | 公開（公告）日： | 2021-06-18 |
| 發明（設計）人： | 韓量;肖波;楊天建;張萬超;李娜;雷美艷 | 申請（專利權）人： | 重慶市藥物種植研究所 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 北京元本知識產權代理事務所(普通合伙) 11308 | 代理人： | 黎昌莉 |
| 地址： | 408435 重*** | 國省代碼： | 重慶;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 花黃 組織培養 方法 | ||
1.用于多花黃精塊莖組織培養的組合物，其特征在于，所述組合物包含外植體處理培養基、愈傷組織誘導培養基和塊莖誘導培養基；
所述外植體處理培養基由MS培養基、6-芐氨基腺嘌呤2.0-3.0mg/L，蔗糖20-35g/L和瓊脂4-8g/L組成；
所述愈傷組織誘導培養基由MS培養基、6-芐氨基腺嘌呤1.5-3.0mg/L ，蔗糖20-35g/L和瓊脂4-8g/L組成；
所述塊莖誘導培養基由1/2MS培養基、萘乙酸0.2-0.5mg/L，蔗糖20-35g/L和瓊脂4-8g/L組成。
2.權利要求1所述的組合物在用于多花黃精塊莖組織培養的應用。
3.一種權利要求1所述的組合物用于多花黃精的組織培養的方法，其特征在于，包括以下步驟：
1）外植體處理：選擇多花黃精帶隱芽的幼嫩塊莖作為外植體，將所述外植體進行滅菌處理后切成外植體小塊，然后接種到權利要求1所述外植體處理培養基上，光照培養直至長出嫩芽；
2）愈傷組織誘導和擴大培養：將所述嫩芽切下，接種于權利要求1所述愈傷組織誘導培養基光照培養，所述嫩芽基部膨大形成愈傷組織；將所述愈傷組織切成小塊，重新接種于所述愈傷組織誘導培養基培養形成愈傷組織，重復3-6次，以擴大培養；
3)塊莖誘導：將擴大培養后的愈傷組織切成愈傷組織小塊，接種于權利要求1所述塊莖誘導培養基光照培養，形成帶芽和根的多花黃精塊莖；
4）低溫處理：將步驟3）獲得的多花黃精塊莖放入1-6℃環境中無光培養30-80天，再轉入光照培養40-80天，形成多花黃精植株；
5)馴化移栽：將所述多花黃精植株煉苗15天以上獲得多花黃精種苗，移栽于土壤。
4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟1）、2）、3）、4）所述光照培養的條件為：培養室溫度23-27℃，光照時間10-12小時，光照強度1800～2200lx。
5.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟1）所述外植體小塊具體為體積為0.3cm3-1cm3的帶隱芽的小塊。
6.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟1）所述滅菌處理包括：清水沖洗干凈，濾紙吸干表面水分，在超凈工作臺上用75%酒精浸泡后無菌水沖洗，無菌濾紙吸干表面水分，0.1%升汞溶液浸泡后無菌水沖洗，無菌濾紙吸干表面水分。
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