[發(fā)明專利]一株地衣芽孢桿菌菌株及其在抑制細(xì)菌性病原菌中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811209863.4
• 申請日: 2018-10-17
• 公開（公告）號: CN109182215B
• 公開（公告）日: 2021-09-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳紅;李昌珠;肖志紅;張愛華;李培旺;曾超珍;黎繼烈;任澤文
• 申請（專利權(quán)）人: 湖南省林業(yè)科學(xué)院;中南林業(yè)科技大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K35/742;A61P31/04;A23K10/18;A01N63/22;A01P1/00;C12R1/10
• 代理公司: 長沙朕揚(yáng)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 43213
• 代理人: 魏龍霞

本發(fā)明公開了一株地衣芽孢桿菌菌株，保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，命名為地衣芽孢桿菌MR?1(Bacillus licheniformis MR?1)，其在廣東省微生物菌種保藏中心的保藏編號為GDMCC No：60393，保藏時(shí)間為2018年6月25日。該菌株具有一定的益生性，對于細(xì)菌性病原菌有一定的抑制性，可用于抑制細(xì)菌性病原菌。本發(fā)明還公開一種地衣芽孢桿菌MR?1在抑制細(xì)菌性病原菌中的應(yīng)用，有力的解決了使用抗生素帶來的細(xì)菌抗藥性及藥物殘留對人體健康的損害問題，甚至可以制作成益生菌飼料添加劑，有助于推進(jìn)油茶枯餅在飼料中的應(yīng)用，增加資源利用率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物工程技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一株地衣芽孢桿菌菌株及其在抑制細(xì)菌性病原菌中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)是芽孢桿菌中較具應(yīng)用潛力的菌種之一。近年來，國內(nèi)外對于地衣芽孢桿菌各方面應(yīng)用的報(bào)道日益增多。在醫(yī)藥、飼料加工、農(nóng)藥等行業(yè)，取得了較好的研究成果。地衣芽孢桿菌具有調(diào)節(jié)動物微生態(tài)平衡，促進(jìn)腸道有益菌生長，降低病原菌的數(shù)量，增加動物機(jī)體的抗病力，提高機(jī)體的免疫功能的作用。

目前，使用抗生素帶來的細(xì)菌抗藥性及藥物殘留對人體健康的損害問題日益嚴(yán)重，急需要尋找一種無毒，無副作用，并對如腸沙門氏菌腸亞種(Salmonella entericasubsp.Enterica)、產(chǎn)氣腸桿菌(Enterobacter aerogenes)、大腸桿菌(Escherichia coli)和金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)等細(xì)菌性病原菌具有抑制作用的天然生長促進(jìn)劑，來代替抗生素以減少抗生素的使用量。這對醫(yī)藥、飼料加工、農(nóng)藥領(lǐng)域來說具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是，克服以上背景技術(shù)中提到的不足和缺陷，提供一株地衣芽孢桿菌菌株及其在抑制細(xì)菌性病原菌中的應(yīng)用。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提出的技術(shù)方案為提供一株地衣芽孢桿菌菌株，該地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)菌株保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，其命名為地衣芽孢桿菌MR-1(Bacillus licheniformis MR-1)，其在廣東省微生物菌種保藏中心的保藏編號為GDMCC No：60393，保藏時(shí)間為2018年6月25日，保藏單位的地址位于廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓廣東省微生物研究所。

上述的地衣芽孢桿菌MR-1(Bacillus licheniformis MR-1)是從新鮮幼豬豬糞中分離純化獲得，在NA平板上，30℃培養(yǎng)一段時(shí)間后，菌落形態(tài)呈白色，扁平狀，透明性差。顯微鏡觀察呈現(xiàn)細(xì)胞呈桿狀，革蘭氏染色為陽性。

上述的地衣芽孢桿菌MR-1(Bacillus licheniformis MR-1)的DNA基因序列，見SEQ ID NO.1所示。

上述的地衣芽孢桿菌MR-1(Bacillus licheniformis MR-1)，其16SrDNA序列在Genbank數(shù)據(jù)庫中用BLAST進(jìn)行同源性分析，得到相似性較高的序列，運(yùn)用MEGA6.06軟件構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹；測得該菌與地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)(KY433888.1)相似性達(dá)到98％，證明該菌株屬于地衣芽孢桿菌屬，結(jié)合形態(tài)學(xué)鑒定為地衣芽孢桿菌MR-1(Bacillus licheniformis MR-1)。

基于一個(gè)總的技術(shù)構(gòu)思，本發(fā)明還相應(yīng)提供一種上述的地衣芽孢桿菌菌株在抑制細(xì)菌性病原菌中的應(yīng)用。

上述的應(yīng)用，優(yōu)選的，所述應(yīng)用的方法具體包括如下步驟：挑取活化后的地衣芽孢桿菌MR-1的單菌落菌絲，于液體NA培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)繁培養(yǎng)，將得到的種子液接種到液體發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，得到地衣芽孢桿菌MR-1發(fā)酵菌液，將所述地衣芽孢桿菌MR-1發(fā)酵菌液與細(xì)菌性病原菌進(jìn)行接觸，即實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌性病原菌的抑制。