[發明專利]一株地衣芽孢桿菌菌株及其在抑制細菌性病原菌中的應用

有效

• 申請號: 201811209863.4
• 申請日: 2018-10-17
• 公開（公告）號: CN109182215B
• 公開（公告）日: 2021-09-24
• 發明（設計）人: 吳紅;李昌珠;肖志紅;張愛華;李培旺;曾超珍;黎繼烈;任澤文
• 申請（專利權）人: 湖南省林業科學院;中南林業科技大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K35/742;A61P31/04;A23K10/18;A01N63/22;A01P1/00;C12R1/10
• 代理公司: 長沙朕揚知識產權代理事務所(普通合伙) 43213
• 代理人: 魏龍霞

1.一株地衣芽孢桿菌（ Bacillus licheniformis ） 菌株，其特征在于，該地衣芽孢桿菌菌株保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，其命名為地衣芽孢桿菌MR-1（Bacillus licheniformis MR-1），其在廣東省微生物菌種保藏中心的保藏編號為GDMCC No：60393，保藏時間為2018年6月25日。

2.一種根據權利要求1所述的地衣芽孢桿菌菌株在抑制細菌性病原菌中的應用，其特征在于，所述細菌性病原菌包括腸沙門氏菌腸亞種（Salmonella enterica subsp. Enterica）、產氣腸桿菌（Enterobacter aerogenes）、大腸桿菌（Escherichia coli）和金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）中的一種或多種。

3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述應用的方法具體包括如下步驟：挑取活化后的地衣芽孢桿菌MR-1的單菌落菌絲，于液體NA培養基中進行擴繁培養，將得到的種子液接種到液體發酵培養基中進行發酵培養，得到地衣芽孢桿菌MR-1發酵菌液，將所述地衣芽孢桿菌MR-1發酵菌液與細菌性病原菌進行接觸，即實現對細菌性病原菌的抑制。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述地衣芽孢桿菌MR-1的活化方法包括以下步驟：在無菌環境下，取一株產蛋白酶短小的地衣芽孢桿菌MR-1挑取一環在固體NA培養基上劃線，在28-35℃條件下倒置培養18-24h后，得到活化的地衣芽孢桿菌MR-1。

5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述固體NA培養基的組分包括牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂和去離子水，所述牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂和去離子水的質量比為（3-4）:（8.9-10.2）:（3.5-5）:（19-21）:1000，所述固體NA培養基的pH為 6.8-7.2。

6.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述液體NA培養基的組分包括牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉和去離子水，所述牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉和去離子水的質量比為（3-4）:（8.9-10.2）:（3.5-5）:1000，所述液體NA培養基的pH為 6.8-7.2。

7.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述液體發酵培養基的組分包括干酪素、牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉和去離子水，所述干酪素、牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉和去離子水的質量比為（3-4）:（2.5-3.5）:（8.9-10.2）:（3.5-5）:1000，所述液體發酵培養基的pH值為7.2-7.4。

8.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述擴繁培養的溫度為28-35℃，擴繁培養的時間為18-24h，擴繁培養時搖床震蕩的轉速為160-180r/min。

9.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述發酵培養的接種量為5-15%，發酵培養的溫度為25-30℃，發酵培養的時間為2-4d，發酵培養時搖床震蕩的轉速為160-180r/min，液體發酵培養基在接種前先經過20-30min的121℃滅菌處理。