[發明專利]一種納米顆粒的制備方法

有效

• 申請號: 201811208437.9
• 申請日: 2018-10-17
• 公開（公告）號: CN109432420B
• 公開（公告）日: 2022-11-18
• 發明（設計）人: 張龍江;楊真露;騰兆剛;文軍;趙穎;王守巨;盧光明
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍東部戰區總醫院
• 主分類號: A61K41/00
• 分類號: A61K41/00;A61K47/69;A61K49/00;A61P35/00;G01N21/64;B82Y5/00
• 代理公司: 北京惠科金知識產權代理有限公司 11981
• 代理人: 趙曉琳

本發明公開了一種納米顆粒及其制備方法，包括通過介孔模板和硅源合成帶有二硫鍵的中空介孔有機氧化硅納米顆粒，其制備方法簡單易行，可重復性高；本發明中制備的納米顆粒可再進一步制備納米探針，其可將光動力治療和氧氣檢測整合于同一體系，可以實現實時監測光動力治療過程中氧氣變化情況。

技術領域

本發明涉及一種納米顆粒的制備方法，屬于生化領域。

背景技術

光動力治療是在波長合適的激光照射下利用光敏劑將氧氣轉變成細胞毒性活性氧，從而殺傷腫瘤細胞。相較于傳統的腫瘤治療方式，光動力治療具有創傷性小、可重復性好、空間選擇性高、副作用少等優點。氧氣作為光動力治療的三大要素之一，與治療效果密切相關，因而準確及時地檢測光動力治療中氧氣變化有利于預測治療反應和優化治療方案。

氧氣電極法(oxygen electrode method)是目前檢測氧氣濃度的金標準，但是這種方法過程復雜且具有創傷性，不適合重復測量。設計無創、簡便、可重復的氧氣檢測方法會更加有利于臨床診療。熒光成像具有安全性好、成本低廉、空間分辨率和敏感性較高、可實時檢測、成像試劑豐富多樣等優點，因此低氧敏感的熒光探針被廣泛研究用于腫瘤乏氧的熒光成像。

目前已有商業化的熒光染料可用于檢測氧氣分子，但是較差的水溶性、潛在的毒性以及較低的探針遞送效率等缺點阻礙了這些熒光染料的臨床應。此外這些熒光染料尚無法實現實時、活體檢測光動力治療中氧氣變化。隨著化學和納米技術的迅速發展，形態多樣、功能豐富的納米材料被設計合成用于醫學領域。

發明內容

發明目的：為了克服現有技術中存在的不足，本發明提供一種納米顆粒的制備方法,本發明不僅可以保護熒光染料免于干擾、利用納米顆粒EPR(enhanced permeabilityand retention)效應提高探針的遞送效率、改善探針水溶性并降低其毒性。此外，本發明制備的納米顆粒的多功能性還體現在能實現氧氣檢測聯合光動力治療，在治療過程中及時檢測氧氣變化有利于調整治療方案，實施個體化治療。

技術方案：為解決上述技術問題，本發明提供的一種納米顆粒的制備方法，包括通過介孔模板和硅源合成帶有二硫鍵的中空介孔有機氧化硅納米顆粒,所述介孔模板為十六烷基三甲基溴化銨,所述硅源為四乙氧基硅烷和(三乙氧基甲硅烷基)丙烷四硫化物。

本發明制備的納米顆粒通過介孔模板和硅源合成，再經氫氧化鈉刻蝕形成中空結構；

可形變的中空介孔有機氧化硅納米顆粒英文縮寫為HMON，其呈一種塌陷樣的納米膠囊狀，尺寸較為均一，大約為213±26nm，具有較大的表面積和孔徑，表面積為401m²g^-1，孔徑為5.4nm。

進一步地，可形變的中空介孔有機氧化硅納米顆粒的制備方法包括如下步驟：

步驟1-1、將0.16g十六烷基三甲基溴化銨、30mL乙醇、75mL純水、1mL濃氨水充分混合后反應1h；得到反應體系A；

步驟1-2、將250μL四乙氧基硅烷和100μL(三乙氧基甲硅烷基)丙烷四硫化物，充分混勻之后快速加入步驟1-1得到的反應體系A中，繼續反應24h；得到產物A；(三乙氧基甲硅烷基)丙烷四硫化物中含有豐富的二硫鍵。

步驟1-3、將產物A經離心收集，用乙醇洗滌三次；得到納米顆粒；

步驟1-4、將步驟1-3中所得到的納米顆粒溶解于含有30mL純水和1.5mL氫氧化鈉溶液的混合溶液A中，保持溫度為25℃，在500rpm轉速攪拌下刻蝕30min；其中氫氧化鈉溶液濃度為10mol L^-1，得到產物B；

步驟1-5、將步驟1-4中得到的產物B經離心收集，用純水和乙醇各洗滌一次，得到產物C；