[發明專利]用于PCR陣列的多基因絕對定量方法在審
| 申請號： | 201811207651.2 | 申請日： | 2018-10-17 |
| 公開（公告）號： | CN109750090A | 公開（公告）日： | 2019-05-14 |
| 發明（設計）人： | 李銘洲;鄭尤琇 | 申請（專利權）人： | 奎克生技光電股份有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6851 | 分類號： | C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 北京同立鈞成知識產權代理有限公司 11205 | 代理人： | 吳志紅;臧建明 |
| 地址： | 中國臺灣新竹科學工業園區*** | 國省代碼： | 中國臺灣;71 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 引子 標準品 核酸樣品 核酸 標靶 多基因 反應孔 正向 序列特異性 擴增效率 拷貝 載具 測試 配置 | ||
1.一種用于PCR陣列的多基因絕對定量方法，包括：
在測試載具的多個反應孔中分別配置用以擴增多個標準品DNA或欲測定的核酸標靶的引子；以及
將已知拷貝數目但數目不同的多個所述標準品DNA及核酸樣品混合加入多個所述反應孔中，所述核酸樣品含有至少一種所述核酸標靶，對多個所述標準品DNA及所述核酸樣品進行qPCR，
其中分別針對每一所述標準品DNA設計具有序列特異性的正向引子及反向引子的組合，在所述正向引子及所述反向引子所對應的區域之間具有相同的DNA模版序列，用以擴增多個所述標準品DNA以及欲測定的所述核酸標靶的引子具有相似的擴增效率。
2.根據權利要求1所述的用于PCR陣列的多基因絕對定量方法，還包括以log(拷貝數目)為橫軸，Cq值為縱軸，依據多個所述標準品DNA的不同拷貝數目以及Cq值制作標準曲線之后，將所述核酸標靶的Cq值代入所述標準曲線，以得到所述核酸標靶的拷貝數目。
3.根據權利要求1所述的用于PCR陣列的多基因絕對定量方法，其中所述擴增效率包括Tm值。
4.根據權利要求1所述的用于PCR陣列的多基因絕對定量方法，其中針對所述測試載具的多個所述反應孔分出多個群組，每一所述群組由多個所述反應孔組成，在每一所述群組的多個所述反應孔中配置同一種用以擴增所述標準品DNA或所述核酸標靶的引子。
5.根據權利要求4所述的用于PCR陣列的多基因絕對定量方法，其中每一所述群組的所述反應孔組成為3×3。
6.根據權利要求4所述的用于PCR陣列的多基因絕對定量方法，其中每一所述群組用以針對多個所述標準品DNA中的其中一者或單一種類的所述核酸標靶進行qPCR。
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