[發明專利]QuEChERS-液相色譜-質譜/質譜法測定蜂蜜中雙甲脒及代謝產物殘留量的方法

在審

• 申請號: 201811194819.0
• 申請日: 2018-10-15
• 公開（公告）號: CN109142607A
• 公開（公告）日: 2019-01-04
• 發明（設計）人: 侯建波;謝文;洪燈;錢艷;姚濱濱;胡曉莉;韓超
• 申請（專利權）人: 浙江省檢驗檢疫科學技術研究院
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 杭州恒翌專利代理事務所(特殊普通合伙) 33298
• 代理人: 王從友

本發明涉及蜂蜜中雙甲脒及其3種代謝產物殘留量測定的方法，尤其涉及QuEChERS?液相色譜?質譜/質譜法同時測定蜂蜜中雙甲脒及其3種代謝產物殘留量的方法。該方法在試樣中加入pH=7的緩沖溶液稀釋后用乙腈和氯化鈉進行提取、鹽析，通過含有N?丙基乙二胺（PSA）、無水硫酸鎂和C₁₈粉末的吸附劑進行分散固相萃取對提取液進行凈化，采用液相色譜?質譜/質譜儀檢測，同位素內標稀釋內標法定量。該方法綠色友好、簡便快捷，消耗資源小，檢測成本低，方法靈敏度能滿足蜂蜜中雙甲脒及其3種代謝產物殘留量的檢測和確證要求。

技術領域

本發明涉及蜂蜜中雙甲脒及其3種代謝產物殘留量測定的方法，尤其涉及一種QuEChERS-液相色譜-質譜/質譜法同時測定蜂蜜中雙甲脒、單甲脒2,4-二甲基苯基甲酰胺和 2,4-二甲基苯胺殘留量的方法。

背景技術

蜂蜜因自身富含多種維生素、礦物質和氨基酸以及人體可直接吸收的單糖(葡萄糖、果糖)等200多種類營養物質，且對于便秘、胃和十二指腸潰瘍病等都有良好的輔助醫療作用，同時可提高人體免疫力，因此作為一種營養豐富的食品越來越被廣大消費者所接受。伴隨人民生活水平的提高，對蜂蜜的需求量也不斷增加，其質量安全直接關系到人體健康。其中蜂蜜中藥物殘留情況一直是消費者除營養成分外的主要關注點，我國藥物和抗生素曾經的濫用情況較為突出，蜂蜜中氯霉素等藥物的檢出曾對其出口造成嚴重的不利影響。

雙甲脒(Amitraz)，又稱N,N-雙(2,4-二甲苯亞氨基甲基)甲胺，是一種有機氮殺蟲、殺螨劑，其具有觸殺和熏蒸作用，對葉螨科各發育階段的蟲態都有效。因此廣泛用于果樹、蔬菜、茶葉、棉花、大豆、甜菜等作物防治多種害螨，對同翅目害蟲也具有良好藥效，還可以用于防治蚜蟲、棉鈴蟲、紅鈴蟲等害蟲。對牛、羊、豬等家畜體外寄生螨也有效，可以防治體虱、壁虱、疥癬和恙蟲等，在蜂蜜養殖中對蜂螨有較好的防治效果，且對蜜蜂屬于低毒性，因此曾被廣泛用于蜂巢除螨。根據雙甲脒的化學性質，其可發生代謝或降解，先形成單甲脒(N-2,4-Dimethyl phenyl-N-methylformamidine，DMPF)、2,4-二甲基苯基甲酰胺 (N-(2,4-DiMethylphenyl)formamide，DMF)，最終降解為2,4-二甲基苯胺(2,4-Dimethylaniline，DMA)。其中單甲脒既是雙甲脒的一個代謝產物，其自身也是殺螨劑，能防治抗三氯殺螨醇的螨，殺螨卵、若螨和成螨，對棉紅鈴蟲、水稻三化螟和二化螟也有一定活性。單甲脒在防治柑橘、蘋果、棉花等作物上的螨，對瓢蟲、草蛉、食蟲蝽象、食螨瓢蟲、棉田蜘蛛、蜜蜂、家蠶比較安全，其毒性較雙甲脒要低。2,4-二甲基苯胺在化工合成中通常作為單甲脒和雙甲脒的合成原料而被使用，但研究表明2,4-二甲基苯胺具有毒副作用和致突變性，對肝臟的損傷較大。

通過食物鏈傳播或直接在蜂巢中使用雙甲脒后，所產生的蜂蜜比較容易被雙甲脒及其代謝產物污染，進而影響消費者的身體健康，如表1所示，各國紛紛制定雙甲脒在蜂產品中(以蜂蜜居多)的最低限量，來保證其的質量安全。

表1主要國家和經濟體對蜂產品中雙甲脒的限量要求

韓國等國家雖然在蜂蜜中并未明確規定雙甲脒的限量要求，但在豬肉等其他動物源性產品以及果蔬產品中雙甲脒的最低限量都有明確規定，我國在出口蜂蜜的殘留監控中也明確要求雙甲脒不得檢出(同時檢測代謝產物)。

基于雙甲脒的穩定性以及代謝情況和檢測手段的限制，目前食品中雙甲脒殘留量的測定通常是將樣品通過酸、堿環境下高溫水解后對最終代謝產物2,4-二甲基苯胺進行測定，再數學轉化成雙甲脒的含量。其中以氣相色譜法或者氣相色譜-質譜法為主。