[發(fā)明專利]分散固相萃取-液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法同時測定蜂王漿中雙甲脒及代謝產(chǎn)物殘留量的方法

在審

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• 申請日: 2018-10-15
• 公開（公告）號: CN109001362A
• 公開（公告）日: 2018-12-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 侯建波;謝文;洪燈;張文華;錢艷;江鵬;盛濤;韓超
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江省檢驗(yàn)檢疫科學(xué)技術(shù)研究院
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 杭州恒翌專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 33298
• 代理人: 王從友

1.分散固相萃取-液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法同時測定蜂王漿中雙甲脒及其代謝產(chǎn)物殘留量的方法，所述的代謝產(chǎn)物為單甲脒，2,4-二甲基苯基甲酰胺和2,4-二甲基苯胺，其特征在于，該方法包括以下的步驟：

一、提取：

稱取蜂王漿試樣2.0g于50mL聚塞離心管中，加入同位素內(nèi)標(biāo)，加入pH＝9的緩沖溶液至10mL，2000轉(zhuǎn)/分鐘，渦旋混勻，靜置5分鐘，加10mL乙腈，2g氯化鈉，2000轉(zhuǎn)/分鐘，渦旋混勻，8500轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘，移取乙腈提取液，水相中再加入10mL乙腈重復(fù)提取一次，合并乙腈提取液，并定容至20mL，取1.0mL乙腈溶液待凈化；

二、凈化

將上述乙腈提取液1.0mL，轉(zhuǎn)移至15mL聚塞離心管中，渦旋，混勻，高速離心，轉(zhuǎn)移全部上清液，加入水定容至2.0mL，渦旋，混勻，過0.22μm濾膜，待液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀測定；聚塞離心管內(nèi)含混合均勻的吸附劑：25mg N-丙基乙二胺PSA、30mg無水硫酸鎂和10mg C₁₈粉末；

三、測定

3.1標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣品溶液在設(shè)定的液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜條件下進(jìn)樣，以質(zhì)量濃度X為橫坐標(biāo)，峰面積的比值Y為縱坐標(biāo)，繪制6點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線對樣品進(jìn)行定量，樣品溶液中各化合物的響應(yīng)值應(yīng)在儀器檢測的線性范圍內(nèi)；

3.2在上述色譜條件下，判斷樣品中是否存在相應(yīng)的被測物，需要滿足如下條件：樣品溶液中出現(xiàn)的質(zhì)量色譜峰保留時間與混合基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液一致，允許偏差小于±2.5％，該色譜峰所對應(yīng)的化合物在設(shè)定的質(zhì)譜定性離子的相對豐度與濃度相當(dāng)?shù)幕旌匣|(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液的相對豐度一致，相對豐度偏差不超過設(shè)定的規(guī)定，則可確定含有該化合物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分散固相萃取-液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法同時測定蜂王漿中雙甲脒及其代謝產(chǎn)物殘留量的方法，其特征在于，步驟一同位素內(nèi)標(biāo)溶液的加入為：雙甲脒-D₆和2,4-二甲基苯胺-D₆內(nèi)標(biāo)物40ng。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分散固相萃取-液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法同時測定蜂王漿中雙甲脒及其代謝產(chǎn)物殘留量的方法，其特征在于，步驟三設(shè)定的各化合物的母離子、子離子和碰撞能量等質(zhì)譜參數(shù)如下：

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4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分散固相萃取-液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法同時測定蜂王漿中雙甲脒及其代謝產(chǎn)物殘留量的方法，其特征在于，步驟三設(shè)定的液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀的儀器條件參數(shù)如下：

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