[發(fā)明專利]利用雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體的方法及其生產(chǎn)的單克隆抗體

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811187760.2
• 申請(qǐng)日: 2018-10-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109265539A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-01-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張洋
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江正熙生物醫(yī)藥有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07K16/00
• 分類(lèi)號(hào): C07K16/00
• 代理公司: 浙江永鼎律師事務(wù)所 33233
• 代理人: 方惠琴

1.一種利用雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將復(fù)蘇后的雜交瘤細(xì)胞置于第一細(xì)胞培養(yǎng)基中，進(jìn)行傳代培養(yǎng)和擴(kuò)大培養(yǎng)，該第一細(xì)胞培養(yǎng)基中血清的體積分?jǐn)?shù)大于10％；

(2)將雜交瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移至第二細(xì)胞培養(yǎng)基中，進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，該第二細(xì)胞培養(yǎng)基中血清的體積分?jǐn)?shù)小于等于10％；

(3)將雜交瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移至無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基中培養(yǎng)，進(jìn)行單克隆抗體的生產(chǎn)。

2.如權(quán)利要求1所述的利用雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體的方法，其特征在于，步驟(1)中，采用第一細(xì)胞培養(yǎng)基對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行復(fù)蘇。

3.如權(quán)利要求1所述的利用雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述的第一細(xì)胞培養(yǎng)基中血清的體積分?jǐn)?shù)為15-30％。

4.如權(quán)利要求1所述的利用雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述的第一細(xì)胞培養(yǎng)基中血清的體積分?jǐn)?shù)為20％。

5.如權(quán)利要求1所述的利用雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體的方法，其特征在于，步驟(2)中，待第一細(xì)胞培養(yǎng)基中雜交瘤細(xì)胞的密度達(dá)到1×10⁶個(gè)/mL時(shí)，將雜交瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移至第二細(xì)胞培養(yǎng)基中培養(yǎng)。

6.如權(quán)利要求1所述的利用雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述的第二細(xì)胞培養(yǎng)基中血清的體積分?jǐn)?shù)為8-10％。

7.如權(quán)利要求1所述的利用雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述的第二細(xì)胞培養(yǎng)基中血清的體積分?jǐn)?shù)為10％。

8.如權(quán)利要求1所述的利用雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體的方法，其特征在于，步驟(3)中，待第二細(xì)胞培養(yǎng)基中雜交瘤細(xì)胞的密度達(dá)到1×10⁶個(gè)/mL時(shí)，將雜交瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移至無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基中培養(yǎng)。

9.如權(quán)利要求1所述的利用雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體的方法，其特征在于，步驟(3)中，無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基的體積與第二細(xì)胞培養(yǎng)基的體積相同。

10.利用如權(quán)利要求1-9中任意一項(xiàng)所述的利用雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)單克隆抗體的方法生產(chǎn)的單克隆抗體，其特征在于，抗體純度達(dá)到95％以上。