[發明專利]能夠鑒定柱花草花粉不育基因的ISSR-SCAR標記及其鑒定方法

有效

• 申請號: 201811163171.0
• 申請日: 2018-09-30
• 公開（公告）號: CN109112230B
• 公開（公告）日: 2021-05-07
• 發明（設計）人: 黃春瓊;劉國道;白昌軍;郇恒福;唐軍;劉一明;王文強;丁西朋;劉攀道;陳志堅
• 申請（專利權）人: 中國熱帶農業科學院熱帶作物品種資源研究所
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 趙蕊紅

1.能夠在不育柱花草中擴增得到的特異性DNA片段，其特征在于所述片段的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.一組能夠鑒定柱花草花粉不育基因的SCAR引物對，其特征在于，所述引物對的核苷酸序列如SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示。

3.權利要求2所述的引物對在柱花草花粉不育基因鑒定方面的應用。

4.一種柱花草花粉不育基因的DNA分子鑒定方法，其特征在于，它包括以下步驟：利用序列為SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的SCAR引物，對柱花草DNA樣品用PCR進行擴增，通過瓊脂糖凝膠電泳對PCR產物進行鑒定；電泳結果中出現一條704bp條帶的樣品為不育柱花草。

5.如權利要求4所述的一種柱花草花粉不育基因的DNA分子鑒定方法，其特征在于，所述PCR反應條件為：15μL體系中包含75ng基因組DNA，0.67μmol/L引物，7.5μL 2×Easy TaqPCR SuperMix，混勻后加入20～30μL礦物油，擴增程序為94℃預變性5min，94℃變性30s，65℃復性45s，72℃延伸1min，共45個循環； 72℃延伸7min；4℃停止反應。