[發明專利]一種基于近紅外光譜技術測定中藥材中馬兜鈴酸I含量的方法

在審

• 申請號: 201811156323.4
• 申請日: 2018-09-30
• 公開（公告）號: CN108918460A
• 公開（公告）日: 2018-11-30
• 發明（設計）人: 孫偉明;黃婷;李祥輝;趙如意;徐文林
• 申請（專利權）人: 福建醫科大學
• 主分類號: G01N21/359
• 分類號: G01N21/359;G01N1/38
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

本發明涉及一種基于近紅外光譜技術測定中藥材中馬兜鈴酸I含量的方法，首先，制備馬兜鈴酸I淀粉定性樣品、川木通定性樣本及關木通定性樣本；制備關木通淀粉定量樣品；然后，采集定性樣品的近紅外光譜圖，利用主成分分析法，建立定性分析模型；采集定量樣品的近紅外光譜圖，采用偏最小二乘法，建立定量分析模型；最后綜合定性分析模型與定量分析模型，獲得中藥材中馬兜鈴酸I的含量；其中，近紅外光譜圖的獲取條件為掃描范圍為4000?10000 cm^?1，在室溫25℃下測定，以空氣作為背景，分辨率為8 cm^?1，掃描次數為32。本發明構建一種無損、簡便且適用性廣的方法，為含馬兜鈴酸I的中藥材以及中成藥質量標準的建立及技術審評提供科學依據。

技術領域

本發明涉及中藥材中馬兜鈴酸I檢測技術領域，特別是一種基于近紅外光譜技術測定中藥材中馬兜鈴酸I含量的方法。

背景技術

中草藥在我國已歷經數千年，經過我們祖先祖祖輩輩的長期使用被證明是有效的，從而形成了燦爛的中醫藥文化。其中，馬兜鈴、關木通、廣防己、朱砂蓮、大葉馬兜鈴、漢中防己、尋骨風等藥用的馬兜鈴科馬兜鈴屬植物因其具有鎮痛、消炎、祛痰、利尿、調節血壓、抗生育活性等作用在臨床上得到了廣泛的應用。然而，這些中藥含有馬兜鈴酸I(aristolochic acid,AA)及其衍生物，長期服用可能造成慢性腎衰竭以及腎小管病變(又稱“中草藥腎病”)。而且，馬兜鈴酸I的累積劑量是尿路上皮癌的一個重要危險因素，致使晚期中草藥腎病的尿路上皮癌發病率較高。因此，部分中草藥和中成藥在國外遭到禁用，中藥國際化進程受到巨大影響。2017年Science子刊Science Translational Medicine封面文章報道了馬兜鈴酸I可以誘發肝癌，致使亞洲地區肝癌患病率高于其它地區。越來越多關于馬兜鈴酸I類物質對人體危害性的報道，引起人們對馬兜鈴酸I類物質檢測技術的重視。馬兜鈴酸I主要存在于馬兜鈴科馬兜鈴屬、細辛屬植物中，包括馬兜鈴酸I和馬兜鈴酸Ⅱ，還含少量的馬兜鈴酸Ⅲ。目前，已有文獻對于含多種中藥材中馬兜鈴酸I含量測定方法的報道，但一般是一種檢測方法只針對一種藥材，缺乏比較系統的研究，又或者測定前期處理復雜，測定成本高且效率較低。因此，建立一種準確可靠、簡便易行、低成本且適用于多數中藥材中馬兜鈴酸I含量測定的方法，對于指導臨床采取防范措施以及更合理用藥具有重大意義。

與傳統分析技術相比，近紅外光譜(Near infrared spectroscopy，NIR)技術能在幾十秒甚至幾秒內，僅通過對樣品的一次紅外簡單測量，就能同時測定一個樣品的幾種甚至幾十種物質的濃度數據，而且具有被測樣品用量很少、無破壞、無污染、無損傷、操作簡單、分析成本低等優勢。近紅外光譜技術最早應用于農副產品分析，后逐漸被應用到石油化工、制藥與臨床醫學、生物化工、環境科學、食品工業等領域，并逐步發展到精確檢測食品中所含有氨基酸、葡萄糖、微量元素等的含量，但其在馬兜鈴酸I檢測中的應用目前并未見諸報道。這主要由于中藥材樣本成分復雜，其近紅外光譜出現重疊，限制了近紅外光譜的在中藥材成分檢測方面的應用。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的是提出一種基于近紅外光譜技術測定中藥材中馬兜鈴酸I含量的方法，利用近紅外光譜(NIR)結合主成分分析法(Principal ComponentsAnalysis，PCA)對中藥材中馬兜鈴酸Ⅰ含量進行定性分析，并利用近紅外光譜結合偏最小二乘法(Partial Least Squares，PLS)對不同濃度的馬兜鈴酸I含量進行檢測并建立定量分析模型，構建一種無損、簡便且適用性廣、成本低的方法。

本發明采用以下方案實現：一種基于近紅外光譜技術測定中藥材中馬兜鈴酸I含量的方法，包括以下步驟：

步驟S1：制備馬兜鈴酸I淀粉定性樣品、川木通定性樣本及關木通定性樣本；

步驟S2：制備關木通淀粉定量樣品；

步驟S3：采集定性樣品的近紅外光譜圖，利用主成分分析法，建立定性分析模型；