[發明專利]一種檢測鮑曼不動桿菌的試劑盒和方法在審
| 申請號： | 201811152404.7 | 申請日： | 2018-09-29 |
| 公開（公告）號： | CN109666749A | 公開（公告）日： | 2019-04-23 |
| 發明（設計）人： | 謝軼;賴紅錦;嚴淳議;巫麗娟;戴仲秋 | 申請（專利權）人： | 四川大學華西醫院 |
| 主分類號： | C12Q1/689 | 分類號： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01 |
| 代理公司： | 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51222 | 代理人： | 李高峽;張娟 |
| 地址： | 610000 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 鮑曼不動桿菌 檢測 試劑盒 溫度程序化 恒溫擴增 交叉引物 低成本 種檢測 | ||
【權利要求書】：
1.一組引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1-5所示。
2.一種用于檢測鮑曼不動桿菌的試劑盒，其特征在于：它包括SEQ ID NO.1-5所示的5條引物。
3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒還包括Bst DNA聚合酶和對應的緩沖液。
4.一種檢測鮑曼不動桿菌的方法，其特征在于：它是采用前述試劑盒檢測。
5.權利要求4所述方法，其特征在于：包括如下步驟：
(1)提取樣本DNA：取待檢樣品，提取其中的DNA；
(2)恒溫擴增：用前述的試劑盒對待檢樣本和鮑曼不動桿菌DNA進行擴增；
(3)結果檢測：對DNA擴增結果進行檢測；
(4)結果判讀：出現與鮑曼不動桿菌DNA擴增條帶一致的條帶，則判斷樣本為陽性。
6.權利要求5所述方法，其特征在于：步驟(2)中的恒溫擴增的溫度為48-54℃。
7.權利要求5所述方法，其特征在于：步驟(2)各引物濃度為：F3 0.25μM，B3 0.25μM，DF5F 0.4μM，DF5B 0.35μM，CPR 0.25μM；
其中，F3、B3、CPR、DF5F和DF5B的序列依次如SEQ ID NO. 1-5所示。
8.權利要求5所述方法，其特征在于：步驟(2)中反應時間為40-80min。
9.權利要求5所述方法，其特征在于：步驟(3)中的結果檢測方法為：膠體金或常規瓊脂糖凝膠電泳中的至少一種。
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