[發明專利]一種龍膽提取物中龍膽苦苷的快速制備方法

在審

• 申請號: 201811144850.3
• 申請日: 2018-09-29
• 公開（公告）號: CN110964069A
• 公開（公告）日: 2020-04-07
• 發明（設計）人: 梁鑫淼;郭秀潔;王超然;郭志謀;高振華;徐欣華;匡海華
• 申請（專利權）人: 泰州醫藥城國科化物生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: C07H17/04
• 分類號: C07H17/04;C07H1/08
• 代理公司: 南京瑞弘專利商標事務所(普通合伙) 32249
• 代理人: 李開婧

1.一種龍膽提取物中龍膽苦苷的快速制備方法，其特征在于，包括以下步驟：（1）水提：取龍膽藥材，加入水加熱提取，過濾、合并濾液，即得龍膽提取液；

（2）膜澄清過濾：龍膽水提取液過陶瓷膜或中空纖維膜進行微濾澄清，截留不溶性顆粒和大分子，收集澄清后的透過液；

（3）反相制備色譜分離：將微濾澄清液直接大體積上樣到極性修飾的耐水性反相色譜柱，根據液相檢測結果，收集合并目標物餾分；

（4）凝膠脫色：將目標物餾分經過陰離子交換填料脫色，收集無色流穿液；流穿液經減壓濃縮后，濃縮干燥，得到白色的高純龍膽苦苷產品。

2.根據權利要求1所述的龍膽苦苷的快速制備方法，其特征在于，步驟（1）中所述的提取用水為蒸餾水或去離子水。

3.根據權利要求1或2所述的龍膽苦苷的快速制備方法，其特征在于，步驟（1）中所述的提取方法為：用5-20倍藥材體積的水60℃-100℃加熱提取1-3次，每次0.5-3 h。

4.根據權利要求3所述的龍膽苦苷的快速制備方法，其特征在于，步驟（1）中所述的提取方法為：用8-10倍藥材體積的水60℃-100℃加熱提取2-3次，每次0.5-1 h。

5.根據權利要求1所述的龍膽苦苷的快速制備方法，其特征在于，步驟（2）中所述的膜澄清過濾為：龍膽水提取液過100-500 nm孔徑的陶瓷膜或5-750KD孔徑的中空纖維膜進行微濾澄清，收集透過液和水頂洗液，合并得澄清液。

6.根據權利要求1所述的龍膽苦苷的快速制備方法，其特征在于，步驟（3）中所述的反相色譜制備方法為：將微濾澄清液直接大體積上樣到極性修飾的耐水性C18，C8或C4反相色譜柱，填料粒徑為5-60 μm；色譜柱內徑為10-1000 mm。

7.流動相為乙醇水或甲醇水，采用梯度或臺階洗脫，根據液相檢測結果，收集合并目標物餾分。

8.根據權利要求1所述的龍膽苦苷的快速制備方法，其特征在于，步驟（4）中所述的離子交換色譜脫色為：將目標物餾分經過陰離子交換填料脫色，收集無色流穿液，色素被吸附于填料柱頭，觀察填料顏色是否飽和以判斷脫色步驟上樣體積，顏色層不超過凝膠柱2/3~3/4體積，然后用水頂洗0.5~2個柱體積，以使目標樣品盡量回收，凝膠柱經堿洗、酸洗恢復正常。

9.根據權利要求1所述的龍膽苦苷的制備方法，其特征在于，步驟（4）中所述的濃縮干燥方法為：微波干燥、冷凍干燥、真空干燥或噴霧干燥。