[發(fā)明專利]一種全自動(dòng)磁珠法DNA提取平臺(tái)及操作方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811143838.0
• 申請(qǐng)日: 2018-09-29
• 公開（公告）號(hào): CN109055365A
• 公開（公告）日: 2018-12-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 柏錦程;張振
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇齊耀生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N15/10
• 分類號(hào): C12N15/10
• 代理公司: 南京利豐知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 32256
• 代理人: 任立

本發(fā)明專利公布了一種全自動(dòng)磁珠法DNA提取平臺(tái)及方法，平臺(tái)包括：移液模塊、移板模塊、加熱震蕩模塊、離心模塊、磁分離模塊、孔板、試管、槍頭存放區(qū)、原料存放區(qū)以及控制器。本發(fā)明避免了頻繁移液，可同時(shí)進(jìn)行48個(gè)樣本的DNA提取，不同試劑、材料采用專用槍頭，槍頭可反復(fù)使用，既節(jié)約了槍頭成本，又避免了試劑、材料的交叉污染，通過控制器，實(shí)現(xiàn)自動(dòng)加樣、孔板轉(zhuǎn)移、離心及DNA分離，保證了DNA提取全過程的自動(dòng)化進(jìn)行，提供一種可進(jìn)行自動(dòng)化提取、耗時(shí)較少、操作簡便、成本更低、精度更高的全自動(dòng)磁珠法DNA提取平臺(tái)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及DNA提取領(lǐng)域，尤其涉及全自動(dòng)DNA提取平臺(tái)。

背景技術(shù)

DNA技術(shù)在法醫(yī)物證領(lǐng)域起到越來越重要的作用，DNA提取系統(tǒng)也已經(jīng)成為當(dāng)今法醫(yī)實(shí)驗(yàn)室必不可少的實(shí)驗(yàn)設(shè)施。當(dāng)前實(shí)驗(yàn)室核酸提取系統(tǒng)多采用手工法或者半自動(dòng)式，繁瑣復(fù)雜，不但延遲了偵破案件的時(shí)間，也影響了案件的偵破效率，越來越成為制約案件偵破的瓶頸，一線工作人員對(duì)全自動(dòng)處理系統(tǒng)的需求越來越急切。

為了確保DNA的有效提取及提取后的DNA能夠在相關(guān)工作中使用，DNA的提取必須遵守以下原則：1)DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)必須完整；2)DNA樣本中不應(yīng)含有抑制酶的有機(jī)溶劑和過高濃度的金屬離子；3)控制其他生物大分子的濃度，避免其污染DNA樣本；4)去除DNA以外的核酸。

DNA的提取目前，用于DNA提取的方法主要有：酚抽提法，利用蛋酶和SDS將細(xì)胞破碎，細(xì)胞內(nèi)的蛋白被消化，使得DNA暴露出來，在利用酚-氯仿進(jìn)行抽提，但對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行了消化并反復(fù)抽提DNA，因此步驟繁瑣，且對(duì)DNA造成了一定影響，使得提取得到的DNA質(zhì)量偏低；甲酰胺解聚法，與酚抽提法相似，不同的是在細(xì)胞破碎后，先將結(jié)合在一起的蛋白質(zhì)與DNA通過高濃度的甲酰胺進(jìn)行解聚，再通過透析以獲取DNA，該方法獲取的DNA質(zhì)量略高于酚抽提法，且操作較酚抽提法簡便，但仍難以滿足DNA樣本的應(yīng)用要求，需進(jìn)一步提高DNA質(zhì)量；堿變性快速制備法，通過NaOH進(jìn)行20min的堿環(huán)境處理，再進(jìn)行鹽酸中和，離心處理之后取上清液，以此獲取DNA，但該方法過于粗糙，無論是堿環(huán)境還酸環(huán)境都會(huì)對(duì)DNA造成一定的破壞，因此該方法得到的DNA數(shù)量較少且質(zhì)量比較差，難以用于深入研究應(yīng)用。

磁珠法DNA提取法與上述幾種方法相比，擁有明顯的優(yōu)勢(shì)：可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)樣品的提取，且能進(jìn)行自動(dòng)化提取；操作簡單，節(jié)約時(shí)間；所用到的工具、材料、試劑均無毒無害，操作人員更為安全；提取的DNA純度高、濃度大，可應(yīng)用于多領(lǐng)域。

整個(gè)國內(nèi)市場，全自動(dòng)微量DNA提取系統(tǒng)主要被QIAGEN、Hamilton以及Tecan等國外品牌所占據(jù)，其平臺(tái)成本高，提取速率慢，在實(shí)際使用過程中現(xiàn)有的全自動(dòng)提取平臺(tái)往往無法應(yīng)對(duì)突發(fā)緊急的案件，從而成為實(shí)驗(yàn)室的雞肋。而成本低、效率高的全自動(dòng)48通道DNA提取工作平臺(tái)成了大勢(shì)所趨。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是解決DNA片段提取過程中操作步驟繁多、提取速度慢、耗時(shí)耗力、提取DNA的精度和純度較低問題，提供一種可進(jìn)行自動(dòng)化提取、耗時(shí)較少、操作簡便、成本更低、精度更高的全自動(dòng)磁珠法DNA提取平臺(tái)即操作方法。