[發明專利]一種全自動磁珠法DNA提取平臺及操作方法

在審

• 申請號: 201811143838.0
• 申請日: 2018-09-29
• 公開（公告）號: CN109055365A
• 公開（公告）日: 2018-12-21
• 發明（設計）人: 柏錦程;張振
• 申請（專利權）人: 江蘇齊耀生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 南京利豐知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32256
• 代理人: 任立

1.一種全自動磁珠法DNA提取平臺，其特征在于：包括：移液模塊(1)、移板模塊(2)、加熱震蕩模塊(3)、離心模塊(4)、磁分離模塊(5)、孔板(6)、試管(7)、槍頭存放區(8)、原料存放區(9)、控制器(10)，所述離心模塊(4)采用獨立離心機，最大離心力1000g；所述孔板(6)位于移板模塊(2)的操作范圍內，上有48個孔洞，用于放置試管(7)，最多可放置48根試管(7)；所述試管(7)放置與孔板(6)中；所述槍頭存放區(8)位于移液模塊(1)的操作范圍內，存放有提取DNA過程中所要用到的槍頭；所示原料存放區(9)位于移液模塊(1)的操作范圍內，存放有提取DNA所需的材料，包括：消化緩沖液、蛋白酶K、DTT、結合液、羥基磁珠、漂洗液和洗脫液七種；所述控制器(10)利用軟件控制系統控制所述的各模塊(1-5)，保證各個模塊(1-5)的有序進行。

2.根據權利要求1所述的一種全自動磁珠法DNA提取平臺，其特征在于：所述移液模塊(1)采用高精度移液系統，移液精度CV值＜5％，與控制器(10)相連，受控制器(10)的控制運行。

3.根據權利要求1所述的一種全自動磁珠法DNA提取平臺，其特征在于：所述移板模塊(2)采用高精度機械臂，三維軸向定位精度±0.2mm，與控制器(10)相連，受控制器(10)的控制運行。

4.根據權利要求1所述的一種全自動磁珠法DNA提取平臺，其特征在于：所述加熱震蕩模塊(3)為加熱震蕩儀，在進行渦旋震蕩的同時可進行加熱，與控制器(10)相連，受控制器(10)的控制運行。

5.根據權利要求1所述的一種全自動磁珠法DNA提取平臺，其特征在于：所述磁分離模塊(5)采用磁棒式分離方式，洗脫體系≥25μl，操作時間不超過40min，與控制器(10)相連，受控制器(10)的控制運行。

6.一種全自動磁珠法DNA提取平臺的操作方法，其特征在于：所述操作方法如下：

(一)準備階段：將槍頭放入槍頭存放區(8)，消化緩沖液、蛋白酶K、DTT、結合液、羥基磁珠、漂洗液和洗脫液放入原料存放區(9)，待提取DNA的樣本漿液裝入試管(7)，并將試管(7)放置與孔板(6)；

(二)裂解：在控制器(10)的自動控制下，移液模塊(1)自槍頭存放區(8)取出槍頭，使用不同槍頭將原材料存放區(9)的消化緩沖液、蛋白酶K、DTT滴入到孔板(6)上的試管(7)中，然后移板模塊(2)將孔板(6)帶著試管(7)一同移動到加熱震蕩模塊(3)，進行消化裂解；

(三)固液分離：裂解完成后，移板模塊(2)將孔板(6)移出加熱震蕩模塊(3)，移入離心模塊(4)，進行固液分離，保留上清液；

(四)結合：移板模塊(2)將孔板(6)移出離心模塊(4)，移液模塊(1)自槍頭存放區(8)取出槍頭，使用不同槍頭將原材料存放區(9)的結合液和羧基磁珠加入到試管(7)中，使磁珠與DNA結合，結合完成后，移板模塊(2)將孔板(6)移至磁分離模塊(5)，進行磁分離，保留羧基磁珠；

(五)洗滌：磁分離后，移板模塊(2)將孔板(6)移出磁分離模塊(5)，移液模塊(1)自槍頭存放區(8)取出槍頭，使用槍頭將原材料存放區(9)的漂洗液加入試管(7)中，進行洗滌，并通過移板模塊(2)將孔板(6)移至磁分離模塊(5)進行磁分離，保留羧基磁珠，如此洗滌兩次；

(六)洗脫：兩次洗滌完成后，移板模塊(2)將孔板(6)移出磁分離模塊(5)，移液模塊(1)自槍頭存放區(8)取出槍頭，使用槍頭將原材料存放區(9)的洗脫液加入試管(7)中，進行洗脫使得DNA從羧基磁珠上脫附，取上清液即可完成DNA提取。